HTMC人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CCC-HPF-1細(xì)胞，人胚肺成纖維細(xì)胞 小鼠腎系膜細(xì)胞,MC53細(xì)胞 CL-0098HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 Rabbit Anti-Biotin 兔抗抗體 LY9 Others Mouse 小鼠 Ly9 / CD229 / SLAMF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)ELISA試劑盒 IgM 兔抗IgM 1mg

FGF5： 纖維母細(xì)胞生長因子5抗體 mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse

HCMEC-c 人類心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HCMEC) 500,000cells 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒 IgM 兔抗雞IgM 0.2ml

FMR1： 脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體 CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

大鼠表皮黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血紅素結(jié)合蛋白(HPX)ELISA試劑盒 phytohaemagglutinin,PHA  植物血凝素 96T

METTL11A： 甲基化樣蛋白11抗體 HuT78細(xì)胞，T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 惡性黑色素瘤,A375細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-01

MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠血紅蛋白(Hb)ELISA試劑盒 ADAM9  小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T

MCC： 大腸癌突變蛋白抗體 人張氏肝細(xì)胞;Chang liver

LLC-MK2恒河猴腎細(xì)胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠血管抑素(ANG)ELISA試劑盒 大鼠c-fos  大鼠c-fos 96T

HTMC人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞HELT： 轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1

JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA試劑盒 CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原 0.5mg

HES6： 轉(zhuǎn)錄因子HES6抗體 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HUVECL

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA 試劑盒 ChRM1(music acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原 0.5mg

HMX2： 同源盒蛋白H6亞型2抗體 FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST ( FS288 ) CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。