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人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化

型 號

產(chǎn)品時(shí)間2024-02-07

所屬分類人源細(xì)胞系

報(bào)價(jià)1500

產(chǎn)品描述:人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化公司正在出售的產(chǎn)品:細(xì)胞過氧化酶體分離試劑盒
細(xì)胞溶酶體形態(tài)染色試劑盒
純化溶酶體功能中性紅檢測試劑盒
分離溶酶體純度雙酶法(COX/AP)檢測試劑盒
動物細(xì)胞染色體分離試劑盒

產(chǎn)品概述

未命名-1.jpg

產(chǎn)品名稱

人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化

貨號

E-XB6571

組織來源

正常主動脈組織

細(xì)胞形態(tài)

長梭形不規(guī)則細(xì)胞樣

生長特性

貼壁生長

細(xì)胞代數(shù)

10代以內(nèi)

種屬

細(xì)胞貨期

現(xiàn)貨,1周左右

背景簡介   人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶hTERT基因。主動脈瓣施半月瓣,位于左心室和主動脈之間,抑制射入主動脈的血液回流入左心室。主動脈瓣鈣化可引起主動脈瓣狹窄關(guān)閉不全等,施導(dǎo)致老年退行性心瓣膜病的重要病理改變,其發(fā)病率隨著年齡的增加而升高。有研究表明,瓣膜間質(zhì)細(xì)胞向城固細(xì)胞樣細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化有可能是主動脈瓣膜鈣化的病理改變基礎(chǔ)之一。

細(xì)胞鑒定   平滑肌肌動蛋白(α-SMA)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,細(xì)胞純度高于90%,不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

細(xì)胞規(guī)格   1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

培養(yǎng)基   人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件   氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

凍存條件無血清凍存液,液氮儲

發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主

 



QQ截圖20240105141906.png


未命名-2.jpg

細(xì)胞傳代復(fù)蘇細(xì)胞

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。






以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

























3.png



未命名-4.jpg

體液單胺氧化酶(MAO)總活性比色法定量檢測試劑盒

紅細(xì)胞可溶性膜蛋白(粗提)制備試劑盒

體液HPV7HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR

CASPASE-10蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

組織總氨基酸含量熒光定量檢測試劑盒

TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒

組織FLT3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

動物細(xì)胞周期S期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

人血液前白蛋白(prealbuminPA)免疫比濁法定量檢測試劑盒

總脂肪酶(lipase)定量檢測試劑盒

頂體形態(tài)刀豆素A凝集素?zé)晒鈽?biāo)記(ConA-FITC)染色試劑盒

細(xì)胞色素P450亞酶2B6BUPROPION)活性高效液相色譜法(HPLC)定量檢測試劑盒

ATPPMCA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

組織艾滋病毒1HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法

人體胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物2抗體

鈣調(diào)磷酸酶B相關(guān)蛋白2抗體

清道夫受體B1+B2抗體

ISLR2蛋白抗體

細(xì)胞分裂周期蛋白23重組兔單克隆抗體

XVII型膠原蛋白/膠原蛋白17/17型膠原蛋白抗體

跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體

APC標(biāo)記人CD42a單克隆抗體

人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化鋅指蛋白744抗體


未命名-3.jpg

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。


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