MCF-10A人乳腺上皮細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FBXO27： FBXO27蛋白抗體 rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 Rattus

HPrSMC-c 人類前列腺平滑肌細胞(HPrSMC) 500,000cells 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml 兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgG 0.1ml

FBXO4： FBXO4蛋白抗體 CM-H032人食管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

A-427(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗人IgM 0.1ml

FGFR3： 成纖維細胞生長因子受體3抗體 大鼠神經(jīng)黑質(zhì)細胞(RNsn)(1×106)

MRas： 原癌基因M-ras抗體 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

NCI-H520(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 A549 [A-549](肺癌細胞) 大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)ELISA試劑盒 MIP-1 Delta(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1 Delta)  小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ 96T

MCP1： 單核細胞趨化蛋白1抗體 敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1

IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白 大鼠(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 L-LDH  大鼠L-鼠乳酸脫氫酶 96T

英文名稱： 抗體 CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

MCF-10A人乳腺上皮細胞貓星形腦膠質(zhì)細胞;PG-4(S+L-) 人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA 試劑盒 Fibulin 1 衰老關(guān)鍵蛋白抗原 0.5mg

HPV16 E6 protein： 人類狀瘤病毒16抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9803

MCF-7(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA 試劑盒 FOS B FosB抗原 0.5mg

HIF-1 Alpha： 缺氧誘導因子1α 抗體 肝細胞生長添加物HGS

CCL13 Protein Human 重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標簽) 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒 FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2) FOS樣抗原2 0.5mg

注意事項：

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。