型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-07
所屬分類人源細(xì)胞系
報(bào)價(jià)1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
SK-CO-1人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | SK-CO-1人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 結(jié)腸;源自轉(zhuǎn)移部位:腹水 |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
支原體檢測(cè) | 無(wú) | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱 背景簡(jiǎn)介 SK -C O -1細(xì)胞來(lái)源于結(jié)直腸病人的轉(zhuǎn)移性腹水。 細(xì)胞規(guī)格 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 培養(yǎng)基 MEM+10%FBS+1%PS 培養(yǎng)條件 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ) 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說(shuō)明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?,?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
體液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
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通用型HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性檢測(cè)試劑盒
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P16基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒
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體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
脂肪肝比色法定量檢測(cè)試劑盒
孕激素受體單克隆抗體
鈣磷蛋白1抗體
親環(huán)蛋白PPIB抗體
IQCF1蛋白抗體
細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體
Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體
跨膜γ羧基酸蛋白1抗體
APC標(biāo)記人CD200單克隆抗體
SK-CO-1人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞鋅指蛋白704抗體
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