傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

U251人膠質(zhì)瘤細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

體液一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測試劑盒

RNA熒光（RiboGreen）定量檢測試劑盒

通用型HSV2（HERPES SIMPLX2）病毒定量PCR擴增檢測試劑盒

石蠟切片組織CASPASE-4蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

血液A高效液相色譜法定量檢測試劑盒

冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒（含HRP二抗）

細胞BLK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅

血液丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒

細胞磷脂酶C（Phospholipase C）活性熒光定量檢測試劑盒

細胞樣品蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

細胞色素P450亞酶CYP2B1（PROD）活性熒光定量檢測試劑盒

石蠟切片組織線粒體復(fù)合物III蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

組織白細胞介素-1β轉(zhuǎn)換酶（ICE）活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒

血清活性碳/葡聚糖處理試劑盒

原鈣粘附蛋白α4抗體

鈣激活鉀通道蛋白β4抗體

橋粒芯糖蛋白1抗體

IMPACT蛋白抗體

細胞表面趨化因子受體7單克隆抗體

vp8蛋白抗體

可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17抗體

APC標記人/小鼠CD11b單克隆抗體

U251人膠質(zhì)瘤細胞鋅指蛋白674抗體