傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

AU565人乳腺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

PC-3M(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA 試劑盒 IgG/Bio 標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

GATA2： GATA結(jié)合蛋白2抗體 SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)

人真皮微血管內(nèi)皮細胞總RNAHDMEC NA 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

Growth Arrest Specific Protein 7： 生長休止特定蛋白7抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1 -EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

REG1B Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1B / PSPS2 人細胞裂解液 (陽性對照) 人脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

Neurotrophin 3： 神經(jīng)營養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 成纖維細胞生長添加物-2FGS-2

Y1小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠酸性0酸酶1(ACP1)ELISA試劑盒 IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1)  小鼠結(jié)合蛋白1 96T

Nurr1： 核受體相關(guān)因子-1抗體 SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0071CT26.WT(小鼠結(jié)腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒 Beta-DF  大鼠β-防御素 96T

Nrf2： 核因子2相關(guān)因子2抗體 大鼠肝細胞;IAR20

AU565人乳腺癌細胞IL-12： 白介素12抗體 CM-H030人外周血白細胞培養(yǎng)基100mL

SP2/0細胞，小鼠骨髓瘤細胞 CTLL-2(T細胞) 人胚肺成纖維細胞;HFL1 人阿米巴(Amebiasis)ELISA 試劑盒 LI-cadherin(liver-intestine cadherin) 肝腸鈣粘連蛋白抗原 0.5mg

IL-4： 白介素4抗體 IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145] 人阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 PDCD4(programmed cell death 4) 凋亡相關(guān)蛋白4抗原 0.5mg

IGFBP9： 結(jié)合蛋白9抗體 人腎癌Wilms細胞;G401