傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

TFK1人膽管癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho-GATA4 (Ser105)： 0酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體 TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0342H4-II-E-C3(大鼠肝癌細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2 人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒 IgM/APC APC標(biāo)記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GATM： GATM蛋白抗體 C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse

HDBEC adult Pellet 人皮膚血管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(成年捐獻(xiàn)者) > 1 mio.cells 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基MCDM-prf 人中性粒細(xì)胞堿性0酸酶(NAP)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GARB1： γ1基受體GABAA Rβ1抗體 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHRF(人巨核細(xì)胞白血病) 大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒 Pentosidine  大鼠戊糖素 96T

NFkB p105 / p50： 細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1

CF Protein Rat 重組大鼠 CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白 大鼠髓樣細(xì)胞觸發(fā)性受體2(EM2)ELISA試劑盒 IL-13(Human Interleukin 13)  人白介素13 96T

Neurokinin A Receptor： 神經(jīng)A受體/K物質(zhì)受體抗體 SERPINB9 Others Human 人 SerpinB9 / CAP-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(EM1)ELISA試劑盒 ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin)  小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素 96T

TFK1人膽管癌細(xì)胞intestinal FABP/IFABP/FABP2： 腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 子宮平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原 0.5mg

ING1： 生長(zhǎng)抑制因子基因1抗體 B18R Others Vaccinia Virus 牛痘病毒 B18R / B19R 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胎盤絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒 WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原 0.5mg

IL-8/CXCL8： 白介素8抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B 人肝癌細(xì)胞，SK-HEP-1細(xì)胞 95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞)