型 號
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-04
所屬分類人源細(xì)胞系
報(bào)價(jià)1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
NCI-H239人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | NCI-H239人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定正確) | 組織來源 | 肺癌;非小細(xì)胞肺癌 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱 NCI-H239;人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 背景介紹 NCI-H239細(xì)胞源于一位51歲患有非小細(xì)胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織,表達(dá)C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs;該細(xì)胞攜帶K-ras 12突變;p53基因246位密碼子突變ATC→ATG;表達(dá)PDGF A和B鏈的異源mRNA;表達(dá)TGFα、TGFβ和EGFR;角蛋白 5、8和18陽性,波形蛋白陽性,神經(jīng)絲蛋白陰性,脫氫酶陰性;據(jù)報(bào)道,在軟瓊脂中該細(xì)胞形成克隆的效率為9.7%。 細(xì)胞規(guī)格 1x106cells/T25或1mL凍存管 培養(yǎng)基 RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗 培養(yǎng)條件 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?,?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
FJX1: 四連接同源蛋白FJX1抗體 CD24 Others Human 人 CD24 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0408NEC(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人組織因子(TF)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
G gamma3: G蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體 hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞 Human
HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基CM 人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
G gamma7: G蛋白偶聯(lián)受體γ7抗體 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SGC7901(胃腺癌細(xì)胞) 大鼠(FE)ELISA 試劑盒 Alpha1-MG 大鼠α1微球蛋白 96T
Mine adenosyltransferase: 蛋酸腺苷轉(zhuǎn)移酶抗體 人細(xì)胞;Hela S3 [HeLaS3]
LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽(CA)ELISA試劑盒 Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) 小鼠膠原酶II 96T
phospho-MAPK11(Thr180+Tyr182): 0酸化原活化的蛋白激酶p38β抗體 CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RAES)ELISA試劑盒 MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) 人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子 96T
NCI-H239人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA 試劑盒 MLH1(Mutl homolog l gene) 錯配修復(fù)蛋白1抗原 0.5mg
ILT2/CD85j: 細(xì)胞表面樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人白細(xì)胞介素4受體(IL-4R)ELISA試劑盒 MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原 0.5mg
Integrin alpha 2/CD49b: 整合素α2抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR 大鼠肝癌細(xì)胞,CBRH-7919細(xì)胞 BEL-7405(肝癌細(xì)胞)
LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人白細(xì)胞介素25(IL-25)ELISA試劑盒 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原 0.5mg
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