型 號
產(chǎn)品時間2024-02-04
所屬分類人源細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時,即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
HNEPC人鼻粘膜上皮細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | HNEPC人鼻粘膜上皮細(xì)胞 | 組織來源 | 鼻粘膜 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25或1mL凍存管 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱 HNEPC;人鼻粘膜上皮細(xì)胞 支原體檢測 無 培養(yǎng)基 90%RPMI-1640+10%FBS 培養(yǎng)條件 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時,即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實驗完成。
(4)消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后,應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
SELPLG Others Human 人 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 兔基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)ELISA試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
phospho-FXYD1 (Ser83): 0酸化0酸神經(jīng)膜抗體 人腦血管平滑肌細(xì)胞RNAHBCSMC miRNA5 μg
EJ細(xì)胞,人膀胱癌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞系,McCoy細(xì)胞 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463): 0酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體 TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈平滑肌細(xì)胞 兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
B16-F10小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠微管關(guān)聯(lián)蛋白τ(MAPτ)ELISA試劑盒 TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha) 人轉(zhuǎn)化生長因子α 96T
Phospho-MKP1 (Ser318): 0酸化原活化蛋白激酶0酸酶1抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0239U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠微管關(guān)聯(lián)蛋白4(MAP4)ELISA試劑盒 N-AChR 大鼠型乙酰受體 48T96T
Metabotropic glutamate receptor 2: 促代謝型谷酸受體2抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5
PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細(xì)胞) 大鼠微管蛋白β3(TUBB3)ELISA試劑盒 ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) 小鼠破骨細(xì)胞分化因子 96T
HNEPC人鼻粘膜上皮細(xì)胞Involucrin: 囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9 人補體片段3c(C3c)ELISA 試劑盒 LH(Luteinizing Hormone) 促黃體生成素抗原 0.5mg
Insulin Receptor R: 胰島素受體相關(guān)受體抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002
OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD8B / P37 / LEU2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人補體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒 LH(Luteinizing Hormone) 人促黃體生成素(多肽) 0.5mg
INCA1: INCA1蛋白抗體 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞HUMSC
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