hESC（H9）人胚胎干細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FMDV Polyprotein (3D polymerase)： 口蹄疫病毒 0.2ml

細(xì)胞色素P450單氧化酶抗體 615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

FBX09： F-box蛋白9抗體 人肺成纖維細(xì)胞;HFL1

GP2-293細(xì)胞，人胚腎上皮包裝細(xì)胞 大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC(HBZY-1),HBZY-1細(xì)胞 CL-0336FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16)  人CXC趨化因子配體16 96T

MMP-1： 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 RBP  大鼠醇結(jié)合蛋白 96T

MMP-1： 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 NCI-H460[H460]細(xì)胞，大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,H4細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32

CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA 試劑盒 CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3)  人CXC趨化因子受體3 96T

hESC（H9）人胚胎干細(xì)胞C22orf28： 22號(hào)染色體開放閱讀框28抗體 角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基CEpiCM-prf

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA 試劑盒 UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor：G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原 0.5mg

C14orf94： 14號(hào)染色體開放閱讀框94抗體 NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人(Amylase)ELISA 試劑盒 GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原 0.5mg

HDDC3： 四0酸鳥苷水解酶抗體 婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4 白血病原髓細(xì)胞，HL-60細(xì)胞 Dami(巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞)