NCI-H660人神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠(Coisol)ELISA試劑盒 Rabbit Anti-dog IgG 兔抗狗IgG 1mg

FAM84A： 感覺(jué)神經(jīng)蛋白1抗體 人脂肪細(xì)胞-皮下(HPA-s)(1×106 )

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株;L615 豚鼠內(nèi)皮型合酶(NOS3)ELISA試劑盒 IgM 兔抗羊IgM 1mg

Frataxin： 線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體 C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 IgG 兔抗豚鼠IgG 1mg

MARK4： 絲酸/蘇酸蛋白激酶MARK4抗體 SERPING1 Others Human 人 SERPING1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系 大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)ELISA試劑盒 ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2)  兔血管生成素2 96T

MEP1A： 苯肽水解酶抗體 小鼠肝癌瘤株;H22

MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞) 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFcp)ELISA試劑盒 Plant growth hormone,GH  植物生長(zhǎng)激素 96T

phospho-MEK2(Thr394)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶2抗體 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

NCI-H660人神經(jīng)內(nèi)分泌前列腺癌細(xì)胞Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells 人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 ChRM3 peptide 毒蕈堿型乙酰受體M3抗原 0.5mg

HS6ST1： 乙酰肝素6腦苷脂轉(zhuǎn)酶1抗體 小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk 癌細(xì)胞，MDA-MB-468細(xì)胞 WK256細(xì)胞，大鼠肉瘤細(xì)胞

CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽) 0.5mg

Humanin： 神經(jīng)保護(hù)肽HN抗體 CL-0186PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2

B16細(xì)胞，人黑色素瘤細(xì)胞 植物乳桿菌 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2 人核糖酶(RNASE)ELISA 試劑盒 CK18 peptide 細(xì)胞角蛋白18多肽抗原 0.5mg