RKO人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GNPAT： 0酸二羥?；D(zhuǎn)移酶抗體 EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA 試劑盒 IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.5ml

GCDGP15： 囊性組織液體蛋白15抗體 Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse

95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人真皮淋巴上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1 人酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒 IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml

phospho-GAB2 (Ser159)： 0酸化接頭蛋白Gab2抗體 豬腎細(xì)胞;PK(15)

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CAL 27-EGFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人舌鱗癌細(xì)胞 CAL 27-EGFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma DMEM+10% FBS+2μg/ml puromycin 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒 (Mouse mammary carcinoma Marker-CA153)  小鼠癌標(biāo)志物-CA153 96T

Neurotrimin： 神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體 TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E6 大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒 AFP-L1(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1)  人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1 96T

Neurexin 1 beta： 軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO

RKO人結(jié)腸腺癌細(xì)胞人心臟成纖維細(xì)胞裂解物HCFL 牛γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 三0酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2 0.5mg

phospho-Kir6.2(Thr224)： 0酸化ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77

BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317 牛β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 beta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽(1-16)多肽 0.5mg

KCNA2B： 電壓門控通道蛋白KVβ.2抗體 rEPC，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓

EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標(biāo)簽) 牛β羥(βOHB)ELISA 試劑盒 Biotin/KLH 偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 2mg