NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Fukutin： 巖藻糖變旋酶抗體 RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 Mouse

NHEK.f pooled Pellet 正常人表皮角質(zhì)細(xì)胞團(tuán)塊(少年者，混合來源) > 1 mio.cells 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECM 山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml

FUNDC1： X三體綜合征相關(guān)蛋白FUNDC1抗體 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA

MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 山羊(Coisol)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/Bio 標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml

Furin： 弗林蛋白酶抗體 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105)

MIP4： 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白18抗體 人低分化肺腺癌細(xì)胞;SK-LU-1

CLCF1 Protein Human 重組人 N1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1(HABP1)ELISA試劑盒 omentin(Mouse omentin)  小鼠網(wǎng)膜素 96T

MITF： MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒 GHRP-Ghrelin  大鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin 96T

MTOR： 雷帕靶蛋白抗體 HO-8910細(xì)胞，卵巢癌細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,MCG803細(xì)胞 大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1

NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞CCL20 Protein Mouse 重組小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人鼻咽癌(NPC)ELISA 試劑盒 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 層粘連蛋白受體1抗體 DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人鼻病毒(RhV)ELISA試劑盒 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端) 0.5mg

IGFBP3： 結(jié)合蛋白3抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1] 轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞，293細(xì)胞 QGY-7703(肝癌細(xì)胞)

TNFSF13 Others Mouse 小鼠 TNFSF13 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人苯并-DNA(PAH-DNA)ELISA試劑盒 MK(Midkine) 中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原 0.5mg

IL-6R Beta/CD130/gp130： 白細(xì)胞介素6受體β抗體 CM-H135人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL