Ishikawa人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

JCA-1細(xì)胞，人前列腺癌細(xì)胞 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞,L6細(xì)胞 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞MOPC 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

GBA： β-葡萄糖腦苷脂酶抗體 HA Others H8N4 甲型流感 H8N4 (A/piail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-H121人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

Grpa： 半乳糖凝集素相關(guān)蛋白A抗體 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R019大鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

Notch 2： 跨膜受體蛋白Notch-2抗體 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21

人腸平滑肌細(xì)胞(HISMC)( 5×105 ) RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rattus 大鼠腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 DHEA-S7(Mouse Dehydroepiandrosterone S7)  小鼠脫氫表雄酮S7 96T

Phospho-IKB beta (Ser23)： 0酸化KB抑制蛋白β抗體 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2087

IL32 Protein Human 重組人 Ierleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽) 大鼠腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 CC16(Human Clara cell protein)  人克拉拉細(xì)胞蛋白 96T

Phospho-NFKB1 (Ser903)： 0酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 FGF2 Others Human 人 VEGF121 / VEGF-A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Ishikawa人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞人表皮黑色素細(xì)胞-中色素裂解物HELM-m L 雞組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA 試劑盒 EGF(Epidermal growth factor)rat 表皮生長(zhǎng)因子多肽 0.5mg

KCNG4： 離子通道蛋白G蛋白4抗體 人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]

CW-2(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 雞總蛋白(TP)ELISA試劑盒 EpCAM 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子 0.5mg

KCTD18： 通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體 CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) 雞總(TC)ELISA試劑盒 EpCAM 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。