BT-549人乳腺管癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GART： 甘酰胺核苷酸合成酶抗體 大鼠癌細(xì)胞;MADB106 胃腺癌細(xì)胞，AGS細(xì)胞 SDBMSC細(xì)胞，SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人肽基脯酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA 試劑盒 IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml

GAS2： 生長休止特定蛋白2抗體 人前列腺上皮細(xì)胞HPEpiC

JEG-3細(xì)胞，人絨癌細(xì)胞 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞,DCS細(xì)胞 人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞HCAEC 人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml

GNG11： G蛋白γ11/Gγ11 抗體 TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

IL2 Protein Canine 重組狗 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 (147 Cys/Ser) 大鼠尿苷二0酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1)ELISA試劑盒 Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1)  小鼠細(xì)胞周期1 96T

NRSF/REST： 神經(jīng)元抑制蛋白抗體 PDE1B Others Human 人 PDE1B 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL 大鼠尿苷二0酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1) ELISA試劑盒 GRO Alpha/CXCL1/MGSA(Human growth-regulated oncogene Alpha/melanoma growth stimulating activity)  人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子 96T

ARHGAP17： 神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 A9細(xì)胞，皮下結(jié)締組織細(xì)胞 人肝星形細(xì)胞正常,LX-2細(xì)胞 CL-0088H4-IIE(大鼠肝癌細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2

NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠尿蛋白(UP)ELISA試劑盒 MBP(Mouse myelin basic protein)  小鼠髓0脂堿性蛋白 96T

BT-549人乳腺管癌細(xì)胞CD24 Others Mouse 小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛干擾素γ(IFN-γ)ELISA試劑盒 AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪細(xì)胞增強結(jié)合蛋白1 0.5mg

Kv4.3： 離子通道蛋白Kv4.3抗體 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30

COS-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 T-24(膀胱變移細(xì)胞癌) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 牛甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒 phospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α1 1mg

KLLN： Killin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白抗體 DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HUAECL 牛甘膽酸(CG)ELISA 試劑盒 ADM 1-52/AM 1-52/Adrenomedullin 1-52 腎上腺髓質(zhì)素(1-52) 0.1mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。