HuH-6人肝母細胞瘤細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FRMD3： FRMD3蛋白抗體 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 小鼠肝動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL

PDGFRB Others Cynomolgus 食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗IgM 0.1ml

FRMD4B： FRMD4B蛋白抗體 人十二脂腸腺癌;HuTu-80

95-C細胞，人低轉移肺癌細胞 大鼠腎小管上皮細胞，NRK細胞 CL-0154MDCK(犬腎細胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗IgG 0.1ml

FRMD7： FRMD7蛋白抗體 FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腦膜細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1)  兔血管內(nèi)皮細胞粘附分子1 96T

MMP-1： 基質金屬蛋白酶-1抗體 K-562細胞，慢性髓原白血病細胞 小細胞肺癌細胞,NCI-H446細胞 人腎上腺皮質癌細胞;SW-13

TWSG1 Others Mouse 小鼠 TWSG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Peanut agglutinin,PNA  花生凝集素 96T

phospho-MEF2C(Thr300)： 0酸化肌細胞增強因子2C抗體 人胚肺成纖維細胞;MRC-5

MCF 10A人正常上皮細胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052) 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 BCGF(Human B cell growth protein)  人B細胞生長因子 96T

HuH-6人肝母細胞瘤細胞KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA 試劑盒 CLDN1(Claudin 1) 緊密連接蛋白1抗原 0.5mg

phospho-HSF1(Ser303)： 0酸化熱休克因子1抗體 人尿道上皮細胞裂解物HUCL

ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標簽) 人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 Claudin-11 peptide 少突膠質細胞跨膜蛋白抗原 0.5mg

phospho-HSF1(Ser307)： 0酸化熱休克因子1抗體 IL27 Others Human 人 IL27 / Ierleukin-27 CHO細胞裂解液 (陽性對照)

人肺大靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端) 0.5mg

注意事項：

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。