型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-17
所屬分類小鼠細(xì)胞系
報(bào)價(jià)1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
小鼠肺成纖維細(xì)胞(永生化)
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肺成纖維細(xì)胞(永生化) | 組織來源 | 肺組織 |
種屬 | 小鼠 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
支原體檢測(cè); | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱 背景簡介;成纖維細(xì)胞是肺間質(zhì)中含量豐富的細(xì)胞種類。這些成纖維細(xì)胞與普通的相似,但也有其的特征,例如具有很長的偽足和細(xì)胞間的間隙連接。肺成纖維細(xì)胞的主要功能為分泌肺泡隔基質(zhì)中的III型膠原,彈性蛋白以及蛋白多糖,也在肺部受損時(shí)擔(dān)任重要的修復(fù)和重建功能。肺部受傷后,在炎癥部位的一定程度的成纖維細(xì)胞積聚是肺部復(fù)原的關(guān)鍵步驟,過多或者不足的成纖維細(xì)胞聚集都會(huì)導(dǎo)致肺功能異常。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。 細(xì)胞鑒定;纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于90% 細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測(cè);無 培養(yǎng)基;小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲(chǔ) 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?,?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ELISA 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4) 48T/96T 進(jìn)口分裝
Mouse S100 protein (S-100) ELISA Kit 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
CLIAKitforLAP(HumanLeucineaminopepridase)ELISAKit人亮氨酰氨基肽酶規(guī)格:48T/96T
通用型WNV(WESTNILE)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
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埃博拉病毒(EBOV)檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
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ELISAKitSmad1小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子規(guī)格:48T/96T
HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠血紅素氧合酶2(HO2)ELISA試劑盒 ,英文名: HO2 ELISA Kit
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Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AILR4ELISAKit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit人著絲粒蛋白B規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞CLK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
腫瘤抑制基因LATS2抗體
果糖-2,6-二磷酸酶2/磷酸果糖激酶2抗體
乳腺癌膜蛋白11/前梯度同源蛋白3抗體
Myoferlin抗體
線粒體核糖體蛋白L27抗體
白細(xì)胞樣受體6抗體
磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體
c-fos單克隆抗體
小鼠肺成纖維細(xì)胞(永生化)堿型乙酰受體AChRα1抗體
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