血栓性疾病、出血性疾病、心血管疾病以及自身免疫性血小板減少癥等疾病的病理生理過程與血小板相關(guān)。血小板功能檢測包括黏附、聚集和活化功能試驗。使用流式細胞儀檢測全血中血小板表面相關(guān)標志物是一種新技術(shù),它拓寬了血小板相關(guān)疾病的診斷與功能研究方法,豐富了血小板功能評估指標。
一、流式細胞儀血小板分析應用范圍
1.通過分析信號傳遞、細胞骨架結(jié)構(gòu)、顆粒釋放、糖蛋白構(gòu)形、膜磷脂、與抗凝因子的結(jié)合和微粒形成,分析血小板活化,血小板對刺激物的反應性。
2.通過分析受激后表面結(jié)合蛋白觸發(fā)凝血鏈式反應和表面糖蛋白缺陷檢測,分析血小板止血功能的獲得性和遺傳性缺陷。
3.結(jié)合血小板大小,檢測血小板RNA含量,分析血小板成熟度,計數(shù)網(wǎng)織血小板。
4.發(fā)現(xiàn)血小板抗體,做定性和定量分析。
二、血小板分析的臨床意義
1.血栓性疾?。夯罨“宓臋z測能預測冠狀血管成形術(shù)后發(fā)生急性缺血事件的危險性,非風濕性心房纖顫患者栓塞和栓塞前期均有血小板活化,胰島素依賴性糖尿病,子癇前期,外周血管疾病等均可測出血小板活力增加和(或)循環(huán)中存在活化血小板,而早產(chǎn)兒的血小板對凝血酶、二磷酸腺苷(ADP)、TXA2的體外激活能力降低。
2.血小板缺陷性疾病:全血法流式細胞術(shù)提供了一個簡單、迅速的方法來診斷血小板膜糖蛋白缺陷性疾病,如巨大血小板綜合征,血小板無力癥等。
3.血小板減少性疾?。浩茐倪^多或生成減少均能導致血小板減少。血小板相關(guān)抗體(PAIg)是反映血小板的破壞的指標,雖然其臨床意義仍有爭議。PAIg的檢測有多種方法,但流式細胞術(shù)法有其*性。流式細胞儀能測定單個血小板上的PAIg,只要測定104甚至103個血小板,在統(tǒng)計學上就能地得出PAIg的平均水平,因而用血量少,只要1 ml血液制備的血小板就足夠。流式細胞術(shù)還能同時測定其他一些反映血小板破壞的指標,如PAIgG、PAIgM、C3等。血小板的生成與巨核細胞有關(guān),全血法流式細胞術(shù)能像檢測網(wǎng)織紅
4.血小板儲存與輸注:用P-選擇素(CD62)、CD63、GPⅡb/Ⅲa作分子標志物,發(fā)現(xiàn)血庫中儲存血小板有時間依賴性的活化現(xiàn)象。儲存5天以上,40%~60%血小板表達活化標志CD62。雖然其形態(tài)改變、乳酸脫氫酶泄漏以及β-TG的釋放也能反映其活化,但用CD62作為儲存血小板的質(zhì)量控制指標。活化的血小板在循環(huán)中的存活時間很短。若血小板在儲存時活化了,即使輸注也不能很好地提高患者止血能力。
5.抗血栓藥物的監(jiān)測:活化血小板的檢測可以判斷患者是否需要抗血栓藥物治療,也可以監(jiān)測這些抗血栓藥物的作用,避免毒副反應的發(fā)生。
6.此外,全血法流式細胞術(shù)還可用于檢測血小板聚集,研究其免疫表型HPA-Ⅰa,測定嚴重血小板減少患者的血小板數(shù)目。
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