型 號
產(chǎn)品時間2024-02-27
所屬分類其它類原代細(xì)胞
報價2600
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細(xì)胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因為方法簡單,細(xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
牛外周血和臍帶血DC細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 牛外周血和臍帶血DC細(xì)胞 | 組織來源 | 外周血和臍帶血 |
種屬 | 牛 | 生長特性 | 半懸浮生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心獲得 | 英文名稱 | bovine Peripheral Blood and Cord Blood DC cells |
貨號 | EY-XY4005 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細(xì)胞鑒定:經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%
支原體檢測:牛外周血和臍帶血DC細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:牛外周血和臍帶血DC細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞代數(shù):第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells, DC)是機(jī)體功能強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞,它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原,未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。DC的來源有兩條途徑:①髓樣干細(xì)胞在GM-CSF的刺激下分化為DC,稱為髓樣DC,也稱DCl,與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞;包括朗格漢斯細(xì)胞,間皮(或真皮)DCs以及單核細(xì)胞衍生的DCs等,②來源于淋巴樣干細(xì)胞,稱為淋巴樣DC或漿細(xì)胞樣DC,即DC2,與T細(xì)胞和和臍帶血DC細(xì)胞 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素27(IL-27)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human deoxypyridinoline crosslinks (DPD) ELISA Kit 人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒
HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 人骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISA試劑盒人血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒構(gòu)建試劑盒1套
Humansolublecytokinereceptor,sCKRELISAKit人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cardiac oponin I (Tn- I) ELISA Kit 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
Rabbitlipoproteinα,Lp-αELSIAKit 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANX-V(HumanAnnexinV)ELISAKit人膜聯(lián)蛋白Ⅴ規(guī)格:48T/96T
血小板因子3(PlateletFactorIII)活性比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
牛外周血和臍帶血DC細(xì)胞豬主要急性期蛋白elisa試劑盒 豬主要急性期蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬主要急性期蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬主要急性期蛋白試劑盒、豬主要急性期蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬上腺素elisa試劑盒 豬上腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬上腺素試劑盒、豬上腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬沙門氏菌抗體elisa試劑盒 豬沙門氏菌抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬沙門氏菌抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬沙門氏菌抗體試劑盒、豬沙門氏菌抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬熱休克蛋白90elisa試劑盒 豬熱休克蛋白90試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬熱休克蛋白90試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白90試劑盒、豬熱休克蛋白90eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗)
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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