型 號
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-26
所屬分類兔原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê唵危?xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來源 | 肝臟 |
種屬 | 兔 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Sinusoidal Endothelial Cells |
貨號 | EY-XY3829 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
肝竇內(nèi)皮細(xì)胞是肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中數(shù)目多的細(xì)胞,約占肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的70%,在表型、功能上與普通毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有較大差異。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞之間缺乏細(xì)胞間連接,細(xì)胞下基底膜物質(zhì)很少,因此竇內(nèi)皮通透性較高,有利于調(diào)節(jié)物質(zhì)交換。不同于肝細(xì)胞的自我復(fù)制,肝再生時(shí)新生LSECs主要來自肝內(nèi)外其他細(xì)胞成分的分化替代,不少研究證實(shí)了肝再生時(shí)LSECs的骨髓源性替代。內(nèi)皮祖細(xì)胞是參與這一過程的主要細(xì)胞成分。 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠α-酚轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TTPα)ELISA試劑盒 ,英文名: TTPα ELISA Kit
人D二聚體(D2D)ELISA檢測試劑盒HumanD-Dimer,D2DELISAKit 96T/48T
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)免疫試劑盒 Rat Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA Kit
英文名稱RatC-PeptideELISAKit大鼠C-肽(C-Peptide)規(guī)格:96T/48T
抗原保護(hù)固著液(10%中性Formalin固著液)50毫升
ELISAKitGL1人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1規(guī)格:48T/96T
魚類脫酶(ID)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ai keratin filame aggregation pheromone / filaggrin aibody (AFA) ELISA Kit 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒
PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforADRA1AELISAKit大鼠能a1A受體規(guī)格:48T/96T
血液乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次
MouseSlit2ELISAKit小鼠Slit2ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞魚促卵泡素 ELISA. 96T/48T
魚促黃體激素 ELISA. 96T/48T
魚0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 ELISA. 96T/48T
魚卵黃高0蛋白 ELISA. 96T/48T
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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