型 號
產(chǎn)品時間2024-02-26
所屬分類兔原代細胞
報價2600
原代細胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng),因為方法簡單,細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進行傳代培養(yǎng)。
兔肺動脈內(nèi)皮細胞
細胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 兔肺動脈內(nèi)皮細胞 | 組織來源 | 肺動脈 |
種屬 | 兔 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 內(nèi)皮細胞樣 | 英文名稱 | Pulmonary Artery Endothelial Cells |
貨號 | EY-XY3815 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:兔肺動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
肺動脈血管內(nèi)皮細胞是一種多功能細胞,尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當其受損,肺血管通透性升高導(dǎo)致肺水腫,在成年人呼吸窘迫綜合癥發(fā)生機制中具有重要意義。但是處于體內(nèi)多因素共同作用的復(fù)雜環(huán)境中,對肺血管內(nèi)皮細胞的功能和代謝以及病變發(fā)生機制很難作深入研究。原代肺動脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究肺血管內(nèi)皮細胞的功能。 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白777抗體
體液單胺氧化酶A型(MAO-A)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
(包括標記探針)
通用型HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒定性檢測試劑盒
石蠟切片組織TNF ALPHA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒
冰凍切片半-4(CASPASE-4)活性原位熒光染色檢測試劑盒
細胞MUSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
酵母細胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
(TOLUIDINE BLUE)原位染色試劑盒
組織短鏈羥脂酰脫氫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒
細胞色素P450亞酶51(羊毛甾醇1,4α去甲基化酶)活性
細胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
冰凍切片基質(zhì)金屬2(MMP2)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒
胚胎干細胞內(nèi)皮細胞(endothelial)定向分化試劑盒
載脂蛋白O抗體
鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體
驅(qū)動蛋白家族成員15抗體
JAK和微管相互作用蛋白2/JAK和微管相互作用蛋白2抗體
細胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體
X射線修復(fù)交叉互補蛋白3抗體
跨膜蛋白59樣蛋白抗體
兔肺動脈內(nèi)皮細胞APC標記人CD94單克隆抗體
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細胞培養(yǎng)實驗)
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。
© 2024 上海一研生物科技有限公司版權(quán)所有 滬ICP備14030958號-14 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) GoogleSitemap