型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-21
所屬分類大鼠原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
大鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞 | 組織來源 | 輸尿管 |
種屬 | 大鼠 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
形態(tài)特征 | 成纖維細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Rat Ureteral Smooth Muscle Cells |
貨號(hào) | EY-XY3441 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
輸尿管位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),上起自腎盂,下終止于膀胱三角。輸尿管管壁分為4層:黏膜表面、固有層、輸尿管肌層和外膜。其中,肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成。 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(CD106)抗體
RatEndostatin,ESELISAKit大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞特恩布爾(TURNBULL-DAB)非血紅素鐵(二價(jià))強(qiáng)化染色試劑盒50次
大鼠促腺皮質(zhì)素釋放激素結(jié)合蛋白(CRHBP)ELISA試劑盒 ,英文名: CRHBP ELISA Kit
P selectin (P-S 人P選擇素(P-S
Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ELISAKitH-2Ⅲ小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類規(guī)格:48T/96T
HumanCoronavirusesIgGELISAKit人流行性乙型腦炎抗體IgG(JEIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠(PK)免疫試劑盒 Mouse pancreatic kininogenase,PK ELISA Kit
對(duì)蝦桃拉病毒(TSV)檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T
Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬5(MMP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISA試劑盒人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠胰原酶(y)ELISA試劑盒 ,英文名: y ELISA Kit
人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-parotidductaibodyELISAKit 96T/48T
腫瘤/睪丸抗原11.2抗體
谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶M2抗體
溶質(zhì)載體家族25成員30抗體
MED9蛋白抗體
細(xì)胞周期調(diào)控因子P78抗體
白介素-17D抗體
磷酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體
大鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞CD3/CD3-ε 抗體
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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