型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-21
所屬分類大鼠原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 | 組織來源 | 結(jié)腸 |
種屬 | 大鼠 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
形態(tài)特征 | 成纖維細(xì)胞樣 | 英文名稱 | 詳見說明 |
貨號(hào) | EY-XY3429 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?,外膜(纖維膜或漿膜)。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形、外縱行平滑??;結(jié)腸運(yùn)動(dòng)少而緩慢,對(duì)刺激的反應(yīng)也較遲緩。 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管生成素樣蛋白4抗體
Humahioredoxin,xELISAKit人硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanprocollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNPELISA試劑盒人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠受體(TSHR)ELISA試劑盒 ,英文名: TSHR ELISA Kit
Mouse 17- Ketosteroid (17-KS) ELISA Kit 小鼠17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP) 48T/96T 進(jìn)口分裝
ELISAKitβ-CG小鼠絨毛膜β規(guī)格:48T/96T
Humanapoptosisproteaseactivatingfactor-1,Apaf-1ELISAKit人凋亡激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人軟骨素(CS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)免疫試劑盒 Mouse Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit
組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 ,英文名: TFPI ELISA Kit
Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris aggliin 2,AFP-L2 ELISA Kit
腫瘤/睪丸抗原38抗體
谷甘肽過氧化酶1重組兔單克隆抗體
溶質(zhì)載體家族39成員11抗體
METRNL蛋白抗體
先天性裂手/裂足畸形相關(guān)蛋白DSS1抗體
白介素1β/IL-1β抗體
磷酸化eIF2B蛋白抗體
大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞CD33抗體
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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