型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-20
所屬分類人原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
人食管成纖維細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 人食管成纖維細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 食管 |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
形態(tài)特征 | 成纖維細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Esophageal Fibroblasts Cells |
貨號(hào) | EY-XY3304 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:人食管成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
食管是咽和胃之間的消化管,哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,其中外膜主要都是成纖維細(xì)胞構(gòu)成的疏松結(jié)締組織,食管通過(guò)其與食管周圍的器官相連。黏膜下層,為厚的疏松結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)部包含食管腺,可分泌粘液排入食管腔。食管癌的發(fā)生中由正常成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的活化的癌相關(guān)纖維母細(xì)胞是腫瘤間質(zhì)微環(huán)境內(nèi)的主要效應(yīng)細(xì)胞,研究證實(shí),包括食管癌在內(nèi)的多種腫瘤組織內(nèi)的癌相關(guān)纖維母細(xì)胞,與正常成纖維細(xì)胞相比, |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無(wú)菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無(wú)特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。
(9) 一般說(shuō)來(lái),若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
公司正在出售的產(chǎn)品:
延伸突觸蛋白1抗體
Humahyroidhormoneaoaibodies,THAAELISAKit人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanProteinCarbonyl,PCELISA試劑盒人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠補(bǔ)體3a(C3a)ELISA試劑盒 ,英文名: C3a ELISA Kit
Rat superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒
RatcomplemefactorH,CFHELISAKit 大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ELISAKitICAM-3/CD50小鼠細(xì)胞間粘附分子3規(guī)格:48T/96T
HumanC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit人C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人尿蛋白(UP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠A(VA)免疫試劑盒 Mouse Vitamin A,VA ELISA Kit
流行性腮腺炎病毒(MV)檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforsLOX-1(HumanSolubleLectin-likeoxidizedlowdensitylipoproteieceptor-1)ELISAKit人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1規(guī)格:48T/96T
三聯(lián)重復(fù)子延展度同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記法檢測(cè)試劑盒10次
ELISAKitbFGF-6人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6規(guī)格:48T/96T
大鼠血管舒緩(BK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2(CDK2)免疫試劑盒 Human Cyclin-depende kinase 2,CDK2 ELISA kit
腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體
過(guò)氧化還原酶1重組兔單克隆抗體
乳腺癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體
NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體
線粒體核糖體蛋白L54抗體
半抑制劑9樣蛋白抗體
磷酸化γ1氨基丁酸受體GABAA Rβ1抗體
人食管成纖維細(xì)胞Coilin蛋白抗體
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