型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-17
所屬分類(lèi)大鼠細(xì)胞系
報(bào)價(jià)1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞永生化
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞永生化 | 組織來(lái)源 | 膝關(guān)節(jié)滑膜組織 |
種屬 | 大鼠 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以?xún)?nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞樣 |
支原體檢測(cè) | 無(wú) | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
背景簡(jiǎn)介;滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤(rùn),由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu),除關(guān)節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過(guò)關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。 滑膜分泌滑液,在關(guān)節(jié)活動(dòng)中起重要作用。正?;し譃閮蓪樱幢〉募?xì)胞層(內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層),是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜,貼附于非關(guān)節(jié)面部分,覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上,不在軟骨面上,此部分稱(chēng)為邊緣區(qū)或“裸區(qū)"。滑膜呈粉紅色,光滑發(fā)亮、濕而潤(rùn)滑,有時(shí)可見(jiàn)絨毛,內(nèi)含膠原性纖維。 滑膜細(xì)胞有A、B兩型。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞,表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)陷、囊泡、線(xiàn)粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體,具有吞噬功能;B型成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS) ,有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu),是介導(dǎo) RA 關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞。 細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測(cè);無(wú) 培養(yǎng)基;原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ) 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說(shuō)明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ELISAKitTNF-β大鼠壞死因子β規(guī)格:48T/96T
通用型動(dòng)物細(xì)胞周期(G1/S和G2/M期)同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人輪狀病毒(RV)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human rotavirus(RV)aibody(IgG)ELISA kit
Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISAKit小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKitAQP-0小鼠水通道蛋白0規(guī)格:48T/96T
HumanBcellreceptor,BCRELISAKit人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠酸性β糖苷酶(GBA)免疫試劑盒 Mouse glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit
動(dòng)物源性成分(18S)檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
CLIAKitforHumanAttacin,AttELISAKit人抗菌肽規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞EPHB2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCCK大鼠膽囊收縮素/腸促肽規(guī)格:48T/96T
大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子121(VEGF121)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF121 ELISA Kit
Mouse aldosterone (ALD) ELISA Kit 小鼠固(ALD)ELISA試劑盒
周期素M2抗體
含賴(lài)卷曲螺旋蛋白1抗體
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體
大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞永生化NDUFB1蛋白抗體
線(xiàn)粒體融合蛋白Mfn2單克隆抗體
胞苷尿苷鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白1抗體
磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體
CX3CL1抗體
單小鼠單抗
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