型 號
產(chǎn)品時間2024-02-17
所屬分類大鼠細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進行細(xì)胞凍存。
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(永生化)
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(永生化) | 組織來源 | 正常主動脈組織 |
種屬 | 大鼠 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 多角狀 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;無 培養(yǎng)基;大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(永生化)專用培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時,即可進行傳代。
(1)嚴(yán)格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細(xì)胞生存,促進細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實驗完成。
(4)消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團塊樣絮狀游離,這時的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進度。
(5)細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后,應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mouse macrophage inflammatory protein 1 beta (MIP-1 beta /CCL4) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
大鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-4 ELISA Kit
MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhumanorosomucoid2,ORM2ELISAKit人類粘蛋白2規(guī)格:48T/96T
同位素(酶切產(chǎn)物)蛋白結(jié)合甲基化干擾足跡法分析試劑盒10次
人E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫試劑盒 Mouse Aquaporin 9,AQP-9 ELISA Kit
蝦特定基因序列(FC)檢測試劑盒 48T
HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA試劑盒人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKitCCL11小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1規(guī)格:48T/96T
ELISAKitMethylase人甲基化酶規(guī)格:48T/96T
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞色素b561(cytb561)免疫試劑盒 human cytb561 ELISA Kit
NO含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒大鼠骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
周期素Y/X抗體
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族2抗體
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體
NDUFB7蛋白抗體
線粒體鐵轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
胞漿蛋白PACSIN3抗體
磷酸化單絲蛋白激酶1/2抗體
CXXC型鋅指蛋白4抗體
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(永生化)葉綠體伴侶蛋白抗體
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