儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:油菜內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)BnACCg8基因PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
平蓋靈芝(樹舌) 種屬:Ganodermaapplanatum(Pers.exWullr)Pat. 安全等級(jí) 1模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 食用。
杏鮑菇 種屬:Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel.安全等級(jí) 1模式菌株 no培養(yǎng)基 20%馬鈴薯汁1L, 葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g ,硫胺素 微量, 瓊脂 15g ,pH 6
冬蟲夏草 種屬:Cordycepssinensis(Berk.)Sacc. 安全等級(jí) 1模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 保健、藥用。
蟲草 種屬:Cordycepssp. 安全等級(jí) 1模式菌株 no應(yīng)用領(lǐng)域 食用
臥孔菌 種屬:Poriasp. 安全等級(jí) 1模式菌株 no
蜜粘褶菌=革裥菌 種屬:Gloeophyllumtrabeum(Pers.)Murr.=Lenzitestrabea(Pers.)Fr. 安全等級(jí) 1模式菌株 no
忍冬木層孔菌 種屬:Phellinuslonicerinus(Bond)BondetSing. 安全等級(jí) 1模式菌株 no
純白環(huán)菇 種屬:Leucoagaricus leucothites (Vittad.) Wasser 安全等級(jí) 1模式菌株 no
櫻桃鏈格孢 種屬:Alternaria cerasi Potebnia 提供形式 斜面培養(yǎng)物模式菌株 no
瓜鏈格孢 種屬:Alternaria cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
簇生鏈格孢 種屬:Alternaria alternata (Fr.) Keissl. 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
煙色煙管菌 種屬:Bjerkandera fumosa (Pers.) P. Karst. 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
白禿馬勃 種屬:Calvatia candida (Rostk.) Hollós 安全等級(jí) 1模式菌株 no
紫色禿馬勃 種屬:Calvatia lilacina (Berk. & Mont.) Henn. 安全等級(jí) 1模式菌株 no
油菜內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)BnACCg8基因PCR試劑盒人小腦顆粒細(xì)胞cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HCGC cDNA
人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HN-h cDNA
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HOPC cDNA
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長)cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HOPC-os cDNA
人雪旺細(xì)胞cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HSC cDNA
人神經(jīng)束膜細(xì)胞cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HPC cDNA
人星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA 現(xiàn)貨供應(yīng) 英文名稱:HA cDNA
?技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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