儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因探針?lè)≒CR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
硝基還原假單胞菌 種屬:Pseudomonasnitroreducens 安全等級(jí) 1模式菌株 no
阿爾萊特葡萄球菌 種屬:Staphylococcusarlettae 安全等級(jí) 1模式菌株 no
米氏硫胺素芽孢桿菌 種屬:Aneurinibacillusmigulanus 安全等級(jí) 1模式菌株 no
溶酪葡萄球菌 種屬:Macrococcuscaseolyticus(Schleiferetal.1982)Kloosetal.1998 安全等級(jí) 1模式菌株 no
調(diào)料葡萄球菌 種屬:Staphylococcuscondimenti 安全等級(jí) 1模式菌株 no
法氏檸檬酸桿菌 種屬:Citrobacterfarmeri 安全等級(jí) 1模式菌株 no
發(fā)酵乳桿菌 種屬:Lactobacillusfermentum 安全等級(jí) 1模式菌株 no
大球蓋菇 種屬:Stropharia rugoso-annulata 描述 子實(shí)體單生、叢生或群生。菌蓋直徑7-45cm,初近半球形,后平展,紅褐色或暗褐色,老后褐色至灰褐色,表面平滑,有纖維狀或細(xì)纖維狀鱗片,濕時(shí)稍有粘性,菌肉肥厚,白色。菌褶(與菌柄)直生,初近白色,后成暗紫灰色,稍寬,褶緣有不規(guī)則的缺刻。菌柄粗壯,9-15×1-4cm,向基部漸粗,中實(shí)或空,表面平滑,有絲狀光澤,初白色,后灰褐黃色,菌環(huán)厚,膜質(zhì),環(huán)上有深溝紋,深裂成星形,裂片先端向上卷,菌環(huán)易脫落,在老熟的子實(shí)體上常消失,孢子印紫褐色,孢子12-15×6.5-9μm,橢圓形,頂端有明顯的芽孔,厚壁,褐緣囊狀體棍棒狀,頂端有小突起,3.5-5.0×8.5-14.5μm
假芝 種屬:Amauroderma rugosum 描述 實(shí)體木栓化,菌蓋近圓形,菌柄中生,菌 孔污白色至暗褐色,. 受傷時(shí)產(chǎn)生出血紅色,后變黑色。菌體表面灰褐色至黑色,無(wú)假漆狀. 光澤,有顯著的縱紋和同心環(huán)帶,具微絨毛或無(wú)絨毛。邊緣鈍或呈截形,有時(shí)薄,波浪狀,稍內(nèi)卷。近圓形或腎形或不規(guī)則形
皂味口蘑 種屬:Tricholoma saponaceum 描述 子實(shí)體小至中等大。菌蓋直徑3-12cm,半球形至近平展,中部稍凸起,濕潤(rùn)時(shí)粘,幼時(shí)白色、污白色,后期帶灰褐色或淺綠灰色,邊緣向內(nèi)卷且平滑。菌肉白色,傷處變橘紅色,稍厚。菌褶白色,傷處變紅,彎生,不等長(zhǎng),中等密至較密。菌柄長(zhǎng)5-12cm,粗1.2-2.5cm,白色,往往向下膨大近紡綞形,基部根狀,內(nèi)部松軟。孢子無(wú)色,光滑,橢圓形至近卵圓形,5.6-8(9.6)μm×3.8-5.3μm
松生擬層孔菌(紅緣擬層孔菌) 種屬:Fomitopsis pinicola 描述 子實(shí)體很大,馬蹄形,半球形,甚至有的平伏而反卷,木質(zhì)。菌蓋直徑2-46cm,初期有紅色、黃紅色膠狀皮殼,后期變?yōu)榛疑梁谏?有寬的棱帶,邊緣鈍,常保留橙色到紅色,下側(cè)無(wú)子實(shí)層。菌肉近白色至木材色,木栓質(zhì),有環(huán)紋。管孔面白色至乳白色,圓形,每毫米3-5個(gè),孢子卵形,橢圓形,光滑,無(wú)色,5-7.5μm×3-4.5μm。擔(dān)子棒狀, 較短, 近無(wú)色, 12.5-24μm×6.5-8μm
解糖熱纖維素菌屬 種屬:Caldicellulosiruptor saccharolyticus 描述 細(xì)胞直桿,0.3~0.4μm × 1.2~4.0μm,無(wú)鞭毛,革蘭氏染色反應(yīng)陰性,不產(chǎn)芽胞。菌落直徑2~5mm,乳白色。嚴(yán)格厭氧,pH范圍5.5~8.0, 適pH6.8。溫度范圍40~78℃,適生長(zhǎng)溫度65℃。多種單、雙、多糖都可作發(fā)酵底物。
致黑脫硫腸狀菌 種屬:Desulfotomaculum nigrificans 描述 直的桿菌,0.3~0.4×4.0~6.0μm,端圓,膨脹。扭轉(zhuǎn)和翻滾運(yùn)動(dòng)。利用乳酸鹽、丙酮酸鹽、葡萄糖和乙醇作為硫酸鹽還原的氫受體,不利用醋酸鹽和甲酸鹽。在有或無(wú)硫酸鹽的情況下丙酮酸鹽通常促進(jìn)生長(zhǎng)。低于0.1μg/ml的鹽酸咪唑啉抑制生長(zhǎng)。由胱氨酸形成硫化氫。嗜熱,溫度范圍為49~70℃,適溫度55℃,能適應(yīng)于35~37℃緩慢生長(zhǎng)。
地下熱袍菌 種屬:Thermotoga subterranean 描述 嗜熱厭氧菌,桿狀、G-,單生或成對(duì)生長(zhǎng),1.5-11μm×0.5-1μm,末端有外鞘結(jié)構(gòu)(0.6×3.5-14μm)。生長(zhǎng)溫度50-75℃,適70℃;pH6.0-8.5,適pH7.0; 鹽濃度0-2.4%,適1.2%。元素硫能抑制生長(zhǎng),能還原胱氨酸和硫代硫酸鹽,生成H2S;胱氨酸和硫代硫酸鹽能解除氫分壓對(duì)菌株生長(zhǎng)的抑制作用。能利用蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白、酵母粉作為碳源;不能利用葡萄糖、麥芽糖。G+Cmol%為40%。
番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因探針?lè)≒CR試劑盒巨軸索神經(jīng)病蛋白GAN抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨細(xì)胞病毒單克隆抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨細(xì)胞病毒抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨細(xì)胞病毒UL23抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
Anti-Kir4.2 Kir4.2抗體(0.2 ml)
Anti-Kir4.1 Kir4.1抗體(50 ul)
Anti-Kir4.1 Kir4.1抗體(50 ul)
Anti-Kir4.1 Kir4.1抗體(25 ul)
Anti-Kir4.1 Kir4.1抗體(0.2 ml)
Anti-Kir4.1 Kir4.1抗體(0.2 ml)
Anti-Kir4.1-ATTO-488 Kir4.1-ATTO-488抗體(50 ul)
?技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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