細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定是什么?
(1)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(6)視具體情況而定。
HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng) |
英文名稱 | HFL1 in human embryo lung fibroblasts |
培養(yǎng) | F12K培養(yǎng)基+10%FBS |
形態(tài):貼壁
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM/F12 +2% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:*建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
步驟是這樣:
1.從動(dòng)物胚胎或者一些剛出生的動(dòng)物的器官或者組織上取得細(xì)胞,配制成細(xì)胞懸浮液.把細(xì)胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).
但是,不要以為這樣就能一直無限培養(yǎng)下去.
因?yàn)樵谀莻€(gè)瓶壁上生長的時(shí)候,如果大量增殖,細(xì)胞之間會彼此相碰,細(xì)胞細(xì)胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.
2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開裝到好幾個(gè)瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).
?
購買我司細(xì)胞全程指導(dǎo):
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會污染,所以我們會及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度136%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
血清的種類和品質(zhì)對于的生長會產(chǎn)生極大的影響,血清對細(xì)胞培養(yǎng)來說是一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,血清使用錯(cuò)誤會造成細(xì)胞無法存活。造成細(xì)胞無法存活的還有培養(yǎng)基,每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)。精氨酸酶ARGINASE
醌酸CHLORANILIC ACID
反式-1,2-環(huán)己(+/-)-trans-1,2-Diaminocyclohexane
2-芐硫基乙醇2-HYDROXYETHYL BENZYL SULFIDE
(R)-4-芐基-2-噁唑烷(R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone
Boc-N-基-L-甘氨酸Boc-N-Methyl-L-phenylglycine
2-基-1-丁醇2-METHYL-1-PENTANOL
酰胺Pent*
4--3-基磺酰4-FLUORO-3-METHYLBENZENESULFONYL CHLORIDE
N-氨基繞丹N-Aminorhodanine
BOC-β-丙氨酸Boc-beta-alanine
2-氨基硫酚2-Aminobenzenethiol
基硫三基硅烷PHENYLTHIOTRIMETHYLSILANE
2-氨基-6-酸2-Amino-6-fluorobenzoic acid
桔梗皂苷 DPlatycodin D
HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)Proteasome 20S alpha 5 蛋白酶體PSMα5抗體 * 0.2ml γ-Dodecalactone
Proteasome 20S alpha 6 蛋白酶體PSMα6抗體 * 0.2ml Fenoxaprop-P
Proteasome 20S alpha 7 蛋白酶體PSMα7抗體 * 0.2ml 6-Hydroxynicotinic Acid
Proteasome 20S beta 3 蛋白酶體PSMβ3抗體 * 0.2ml 1-Heptanol
Proteasome 20S beta 6 蛋白酶體PSMβ6抗體 * 0.2ml Indene
Proteasome 20S beta 7 蛋白酶體PSMβ7抗體 * 0.2ml Eicosane
Proteasome 20S alpha + beta 蛋白酶體PSMα+β抗體 * 0.2ml 2-Ethyl-1-hexanol
Proteasome 20S alpha 1+2+3+5+6+7 蛋白酶體PSMα1+2+3+5+6+7抗體 * 0.2ml 2-Ethyl-1,3-hexanediol
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