細(xì)胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定是什么？

（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
（5）視具體情況而定。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞前3天照片的，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（6）視具體情況而定。
A498人腎癌細(xì)胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

形態(tài)：貼壁
細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件：DMEM/F12 +2% FBS；37℃，5% CO2
傳代方法：*建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件：90%FBS+10%DMSO
步驟是這樣:
1.從動(dòng)物胚胎或者一些剛出生的動(dòng)物的器官或者組織上取得細(xì)胞,配制成細(xì)胞懸浮液.把細(xì)胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).
但是,不要以為這樣就能一直無限培養(yǎng)下去.
因?yàn)樵谀莻€(gè)瓶壁上生長的時(shí)候,如果大量增殖,細(xì)胞之間會(huì)彼此相碰,細(xì)胞細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.
2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開裝到好幾個(gè)瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).

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購買我司細(xì)胞全程指導(dǎo)：
1)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度136%，進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。
血清的種類和品質(zhì)對于的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響，血清對細(xì)胞培養(yǎng)來說是一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，血清使用錯(cuò)誤會(huì)造成細(xì)胞無法存活。造成細(xì)胞無法存活的還有培養(yǎng)基，每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)。胰月示-亞硫酸-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)TSC AGAR

固ALDOSTERONE

L-精氨酸叔丁酯二酸L-ARGININE T-BUTYL ESTER DIHYDROCHLORIDE

2-碘酸酯Methyl 2-iodobenzoate

3-基吲哚3-Methylindole

2-咪唑啉半水合物2-Imidazolidone hemihydrate

次烏頭Hypaconitine

十六烷基二基芐基化銨Benzyldimethylhexadecylammonium chloride

2-2-Chloroanisole

3-基并噻吩3-METHYLBENZO[B]THIOPHENE

溴Bromoxynil

洋薊素cynarin

三基十四化膦化物TRIHEXYL(TETRADECYL)PHOSPHONIUM CHLORIDE

聚氧乙氫化蓖麻油Ethoxylated hydrogenated castor oil

2,7-二羥基萘2,7-Dihydroxynaphthalene
A498人腎癌細(xì)胞說明書Laminin Beta 2/Laminin S  層粘連蛋白β2抗體    * 0.2ml Asulam

Plakophilin 1  橋粒斑菲素蛋白1抗體    * 0.2ml Bepotastine besilate

phospho-ALK/CD246(Tyr1604)  磷間變型淋巴瘤激酶抗體    * 0.1ml Sodium copper chlorophyllin

phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283)  磷間變型淋巴瘤激酶抗體    * 0.1ml Neochlorogenic acid

phospho-ALK/CD246(Tyr1586)  磷間變型淋巴瘤激酶抗體    * 0.1ml Ivabradine HCl

SMOC2  分泌模塊鈣結(jié)合蛋白2抗體（平滑肌相關(guān)蛋白2）    * 0.2ml Xanthophyll

Sprouty 2  快速發(fā)育生長因子同源蛋白2抗體    * 0.1ml Xanthophyll

THSD1  血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體    * 0.2ml Xanthophyll