收到OP9小鼠骨髓基質細胞培養(yǎng)后的處理:
1)收到細胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細胞的生長狀況,有無細胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉移至50ml離心管或廣口瓶中(若細胞漂浮嚴重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉移至另一個大離心管中,留一點吹打細胞沉淀成懸液,回收細胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補加自己新配的培養(yǎng)基至適當容積,例如4ml,讓細胞適應一下環(huán)境。 當細胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
產品名稱:OP9小鼠骨髓基質細胞培養(yǎng)
英文名稱:OP9 mouse bone marrow stromal cells
培養(yǎng)基:a-MEM培養(yǎng)基+20%FBS
產品運輸:免費快遞
產品包裝:瓶裝
產品用途:細胞培養(yǎng)研究
操作說明:
1)對于常溫運輸?shù)募毎?,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細胞)嚴格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內做細胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募毎?,請取出冷凍管后,須立即放?7C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
?注意事項:
1)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
(R)-1-Boc-3-羥基吡咯烷(R)-(-)-N-Boc-3-pyrrolidinol
原卟啉Protoporphyrin IX
利多卡因Xylocaine
2-基四喃-3-2-Methyltetrahydrofuran-3-one
5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯5(6)-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester
2,3,5,6-四醇2,3,5,6-Tetrafluorobenzyl alcohol
磺酰胺Benzenesulfonamide
羥基基次膦酸NA
2,2,6-三基環(huán)庚烷2,2,6-TRIMETHYLCYCLOHEXANONE
N-芴氧羰基-BETA-叔丁基-L-天冬氨酸五酯FMOC-ASP(OTBU)-OPFP
占噸氫醇9-Hydroxyxanthene
中性樹膠Neutral balsam
3-吡咯烷酸3-PYRROLIDINONE, HYDROCHLORIDE
4-基吡唑4-Nitropyrazole
Boc-甘氨酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯BOC-GLY-OSU
OP9小鼠骨髓基質細胞培養(yǎng)phospho-ANAPC1(Ser377) 磷細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 * 0.1ml Vardenafil hydrochloride trihydrate
Agrin 聚集蛋白抗體 * 0.1ml Bestatin,Ubenimex
CENPT 著絲粒蛋白T抗體 * 0.2ml Bestatin,Ubenimex
RanGAP1 RAN GTPase酶激活蛋白1抗體 * 0.2ml (3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid
PRC1 胞質分裂調控蛋白1抗體 * 0.1ml PD-0325901
CDCREL/SEPT5 細胞周期調控相關蛋白1 * 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC-11249; Thelin
SEPT6 細胞分蛋白SEPT6抗體 * 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC-11250; Thelin
Septin 8 細胞分蛋白SEPT8抗體 * 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC-11251; Thelin
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