細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定是什么?
(1)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(6)視具體情況而定。
SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng) |
英文名稱 | SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells |
培養(yǎng) | DMEM培養(yǎng)基+5%FBS |
形態(tài):貼壁
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM/F12 +2% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:*建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
步驟是這樣:
1.從動(dòng)物胚胎或者一些剛出生的動(dòng)物的器官或者組織上取得細(xì)胞,配制成細(xì)胞懸浮液.把細(xì)胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).
但是,不要以為這樣就能一直無限培養(yǎng)下去.
因?yàn)樵谀莻€(gè)瓶壁上生長(zhǎng)的時(shí)候,如果大量增殖,細(xì)胞之間會(huì)彼此相碰,細(xì)胞細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.
2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開裝到好幾個(gè)瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).
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購(gòu)買我司細(xì)胞全程指導(dǎo):
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度136%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
血清的種類和品質(zhì)對(duì)于的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響,血清對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)來說是一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源,血清使用錯(cuò)誤會(huì)造成細(xì)胞無法存活。造成細(xì)胞無法存活的還有培養(yǎng)基,每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)。新銅試劑Neocuproine
2,2,6,6-四基啶-1-氧基2,2,6,6-Tetramethylpiperidinooxy
Fmoc-O-三基-L-絲氨酸Fmoc-O-trityl-L-serine
基磺酸酯Chloromethyl chlorosulfate
4-羥基酰肼4-Hydroxybenzhydrazide
磷酸二異丙酯Diisopropyl chlorophosphate
2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑5-Ami,3,4-thiadiazole-2-thiol
鄰二酚紫Pyrocatechol Violet
(基硫代)醋酸乙酯ETHYL (PHENYLTHIO)ACETATE
丙基二基硅烷ALLYLDIMETHYLCHLOROSILANE
辣椒油Chili Oil
素ARTEMISININ
雙十烷基二基溴化銨Didecyldimethylammonium bromide
對(duì)羥基4-Methoxyphenol
FMOC-2-NAL-WANG RESINFMOC-2-NAL-WANG RESIN
SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細(xì)胞培養(yǎng)MICB MHC I類鏈相關(guān)蛋白B * 0.1ml Enoxaparin sodium
TAPA1/CD81 CD81抗體 * 0.1ml Trimebutine maleate
HAND2 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體 * 0.1ml Heparin sodium
MYF5 生肌決定因子Myf5抗體 * 0.1ml HE-β-CD
SCC112/PIG54 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體 * 0.1ml Nefopam HCl
EBNA1/EBV Nuclear Antigen EB病毒核抗原1抗體 * 0.2ml Methotrexate disodium
β-synuclein/SNCB 核突觸蛋白β抗體 * 0.2ml Methotrexate disodium
KDEL (ER Marker) 賴,天冬,谷,亮相關(guān)序列抗體 * 0.2ml Sarafloxacin HCl
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