注意事項(xiàng):
1)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
2)對(duì)于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對(duì)于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:B16-F10小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞圖片
英文名稱:B16-F10 mouse melanoma cell
培養(yǎng)基:DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
產(chǎn)品運(yùn)輸:免費(fèi)快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
操作說明:
1)對(duì)于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運(yùn)輸問題,請(qǐng)75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。
2)對(duì)于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請(qǐng)取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
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收到B16-F10小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞圖片后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀況,有無細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會(huì)有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個(gè)大離心管中,留一點(diǎn)吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補(bǔ)加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
三基己二異酸酯(2,2,4- 和 2,4,4- 混合物)TRIMETHYLHEXAMETHYLENE DIISOCYANATE
TPCK-胰蛋白酶Trypsin, DPCC treated, from bovine pancreas
硫化亞銅COPPER(I) SULFIDE
三乙氧基丙烷NA
十二烷基磺酸1-DODECANESULFONIC ACID SODIUM SALT
2,5-二溴基2,5-Dibromonitrobenzene
酸Propiolic acidd
乙胺酸Ethylamine hydrochloride
2-基-5-氧基NA
2-羥基乙2-HYDROXYACETOPHENONE
5(6)-羧基熒光素二乙酸酯5(6)-CARBOXYFLUORESCEIN DIACETATE
三乙基四喃溶液Triethylborane
2-基-2-噻唑啉2-Methyl-2-thiazoline
Hanks`Balanced salt(Hanks平衡)NA
3-羥基吡啶3-Hydroxypyridine
B16-F10小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞圖片IL-11RA 白介素11受體α/IL-11Rα抗體 * 0.2ml Imipenem and Cilastatin Sodium
KCNQ-1 離子通道蛋白家族KCNQ1抗體 * 0.1ml Vinpocetine
IL-10 白細(xì)胞介素-10抗體 * 0.1ml Phenytoin sodium
LIPG/Endothelial lipase 內(nèi)皮脂肪酶抗體 * 0.2ml Oxcarbazepine
MSR1/CD204 巨噬細(xì)胞清道夫受體1/2/3抗體 * 0.2ml Oxcarbazepine
NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白抗體 * 0.2ml Hypericin
Perilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B抗體 * 0.2ml D-(+)-Glucopyranose 6-phosphate
FLIP delta + gamma 凋亡調(diào)節(jié)蛋白δ+γ抗體 * 0.2ml D-Gluconate 6-phosphate 3sodium salt
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