收到CRFK貓腎細(xì)胞培養(yǎng)后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無(wú)縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況,有無(wú)細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開(kāi)瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會(huì)有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個(gè)大離心管中,留一點(diǎn)吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補(bǔ)加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
產(chǎn)品名稱:CRFK貓腎細(xì)胞培養(yǎng)
英文名稱:CRFK feline kidney cells
培養(yǎng)基:RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
產(chǎn)品運(yùn)輸:免費(fèi)快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
操作說(shuō)明:
1)對(duì)于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問(wèn)題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒(méi)有運(yùn)輸問(wèn)題,請(qǐng)75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開(kāi)始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過(guò)郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。
2)對(duì)于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請(qǐng)取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
?注意事項(xiàng):
1)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。
2)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度。
3)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
4-氨基二4-Phenoxyaniline
對(duì)p-Fluorotoluene
4-?;溥?H-Imidazole-4-carbaldehyde
丁酰乙酸乙酯Ethyl butyrylacetate
異酸4-(三氧基)酯4-(Trifluoromethoxy)phenyl isocyanate
四氫吡喃Tetrahydro-4H-pyran-4-one
泛酸鈣,一水PANTOTHENIC ACID CALCIUM SALT MONOHYDRATE
α-松油醇(-)-alpha-Terpineol
乙酰金剛烷胺N-(1-Adamantyl)acetamide
1-己-3-醇1-Hexen-3-ol
托品Tropinone
Boc-L-谷氨酰胺N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-glutamine
十二烷基二基叔胺N,N-Dimethyldodecylamine
鎵標(biāo)準(zhǔn)溶液GALLIUM
4--6-乙基-5-嘧啶4-Chloro-6-ethyl-5-fluoropyrimidine
CRFK貓腎細(xì)胞培養(yǎng)Mycobacterium human 人結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體 * 0.2ml Drospirenone
NF-ATc4 T細(xì)胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體 * 0.2ml Drospirenone
Unc18-3 突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體 * 0.2ml Ethiny Estradiol
caspase-8 subunit p18 半胱蛋白酶8抗體 * 0.2ml Ethiny Estradiol
IRAK1 白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 * 0.1ml Ethionamide
phospho-APE(Ser1417) 磷肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 * 0.1ml Ethionamide
PRDM1/Blimp1 B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體 * 0.2ml Etravirine
Dlx1 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體 * 0.2ml Famotidine
© 2024 上海一研生物科技有限公司版權(quán)所有 滬ICP備14030958號(hào)-14 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) GoogleSitemap