收到B16-F0小鼠黑色素瘤細(xì)胞說明書后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀況,有無細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個大離心管中,留一點吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
產(chǎn)品名稱:B16-F0小鼠黑色素瘤細(xì)胞說明書
英文名稱:B16-F0 mouse melanoma cells
培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS
產(chǎn)品運輸:免費快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
操作說明:
1)對于常溫運輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運輸問題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時間一般為6-12小時后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募?xì)胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
?注意事項:
1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細(xì)胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
酸去氧腎上腺素Phenylephrine hydrochloride
3-氨基-4-羥基酸3-Amino-4-hydroxybenzoic acid
2,3-二基-4-吡啶-N-氧化物4-Chloro-2,3-dimethylpyridine 1-oxide
人淋巴細(xì)胞分離液People lymphocyte separation fluid
2,6-二基胺2,6-Dinitroaniline
3-芐氧基-1-丙醇3-Benzyloxy-1-propanol
3-氨基酸乙酯基磺酸Tricaine methanesulfonate
D-天門冬氨酸芐酯對磺酸D-ASPARTIC ACID(OBZL)-OBZL P-TOSYLATE
二環(huán)己基碳二亞胺Dicyclohexylcarbodiimide
2,4,6-三叔丁基胺2,4,6-TRI-TERT-BUTYLANILINE
7-羥基吲哚7-Hydroxyindole
3-氨基-5-基異唑3-Amino-5-methylisoxazole
H-精氨酸-PNA二酸L-ARGININE P-NITROANILIDE DIHYDROCHLORIDE
6201擔(dān)體6201 Pink diatomite
H-ILE-2-CHLOROTRITYL RESINH-ILE-2-CLTRT RESIN
B16-F0小鼠黑色素瘤細(xì)胞說明書MAGEF1 黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗體 * 0.2ml Candesartan cilexetil
Msx2/Hox8 同源盒基因Msx2抗體 * 0.2ml Canertinib
NMT2 肉豆蔻?;D(zhuǎn)移酶2-N端肽抗體 * 0.2ml 2-Guanidinoethylmercaptosuccinic Acid
DOK3 對接蛋白3抗體 * 0.2ml Carbetapentane citrate/Pentoxyverine citrate
NRG3 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體 * 0.2ml Carprofen
OTUB 泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體 * 0.2ml Carprofen
PRR11 富含脯蛋白11抗體 * 0.2ml Catharanthine
S100A7/Psoriasin S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 * 0.2ml Albendazole
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