注意事項:
1)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:293T/17人胚腎細(xì)胞說明書
英文名稱:Human embryonic kidney cell line 293T/17
培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS
產(chǎn)品運(yùn)輸:免費(fèi)快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
操作說明:
1)對于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運(yùn)輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時間一般為6-12小時后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
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收到293T/17人胚腎細(xì)胞說明書后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀況,有無細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個大離心管中,留一點(diǎn)吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補(bǔ)加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
亞基N-Nitrosodiphenylamine
5-氨基煙酸5-Aminonicotinic acid
2,6-二乙?;拎?,6-Diacetylpyridine
N-CBZ-BZL-組氨酸Z-HIS(BZL)-OH
2-酸吡嗪2-Pyrazinecarboxylic acid
4-溴酰4-Bromobenzoyl chloride
5-羧基尿苷Uridine-5-Acetic Acid
氫化鈣CALCIUM HYDRIDE
4-羥基異亮氨酸4-HYDROXYISOLEUCINE
三基乙酸Pivalic acid
十二酰Lauroyl chloride
MILL培養(yǎng)基NA
環(huán)丁基基CYCLOBUTYL METHYL KETONE
偶氮胂IARSENAZO I TRISODIUM SALT
溴乙縮二乙醇Bromoacetaldehyde diethyl acetal
293T/17人胚腎細(xì)胞說明書PRRSV M protein 豬藍(lán)耳病病毒M蛋白抗體 * 1ml Leuprorelin Acetate (Leuprolide Acetate)
CPN10 葉綠體伴侶蛋白抗體(蘋果) * 1ml Levetiracetam
FMDV Polyprotein (3D polymerase) 口蹄疫病毒 * 0.2ml Levetiracetam
Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent) /抗體 * 0.1ml Lincomycin HCl
Chloramphenicol 霉素抗體 * 0.2ml Lincomycin HCl
ADAR1 (N-terminus) 雙鏈RNA腺苷脫基酶抗體(N端) * 0.2ml Liothyronine sodium
BRLF1 立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因) * 0.2ml Lomefloxacin HCl
ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺苷脫基酶抗體(C端) * 0.2ml Lomefloxacin HCl
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