參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人基質(zhì)金屬蛋白酶基因PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?人基質(zhì)金屬蛋白酶基因PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
Akirin1蛋白(AKIRIN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forAkirin1(AKIRIN1)
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子11(FGF11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forFibroblastGrowthFactor11(FGF11)
環(huán)加氧酶1(PTGS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forProstaglandinEndoperoxideSynthase1(PTGS1)
Ⅱ型前膠原氨基端原肽(PⅡNT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forProcollagenIIN-TerminalPropeptide(PIINP)
多肽-N-酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶6(GALNT6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forPolypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase6(GALNT6)
腺瘤息肉病大腸桿菌蛋白(APC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forAdenomatosisPolyposisColiProtein(APC)
絲氨酸組合因子3(SERINC3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forSerineIncorporator3(SERINC3)
精特異性抗原2(SSFA2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forSpermSpecificAntigen2(SSFA2)
狀旁腺素受體2(PTHR2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forParathyroidHormoneReceptor2(PTHR2)
胃動(dòng)素(MTL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forMotilin(MTL)
外切酶體成分8(EXOSC8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
外切酶體成分9(EXOSC9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
外生骨疣蛋白1(EXT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
外生骨疣蛋白2(EXT2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
外皮蛋白(EVPL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
人基質(zhì)金屬蛋白酶基因PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格PCNA/FITC 熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原IgG 規(guī)格: 0.2ml *
PCNA/FITC 熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原IgG 規(guī)格: 0.2ml *
PCX/FITC 熒光素標(biāo)記足細(xì)胞特異蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
PD-1/FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡1IgG 規(guī)格: 0.2ml *
PDCD4/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白4IgG 規(guī)格: 0.2ml *
TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19IgG 規(guī)格: 0.2ml *
PDE4D/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸二酯酶4DIgG 規(guī)格: 0.2ml *
PDEF/FITC 熒光素標(biāo)記上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子IgG 規(guī)格: 0.2ml *
PDGF-A/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-AIgG 規(guī)格: 0.2ml *
PDGF-B/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-BIgG 規(guī)格: 0.2ml *
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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