注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:蠟樣芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
蠟樣芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
顆粒體蛋白(GRN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forGranulin(GRN)
分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forSecretograninIII(SCG3)
N-酰轉(zhuǎn)移酶8(NAT8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forN-Acetyltransferase8(NAT8)
Apelin12蛋白(AP12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forApelin12(AP12)
突觸囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forSynaptotagminI(SYT1)
狀腺球蛋白(TG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forThyroglobulin(TG)
N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forN-mycDownstreamRegulatedGene2(NDRG2)
24-脫氫膽固醇還原酶(DHCR24)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T for24-DehydrocholesterolReductase(DHCR24)
細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forIntercellularAdhesionMolecule1(ICAM1)
角蛋白17(KRT17)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forKeratin17(KRT17)
雙特異性磷酸酶1(DUSP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
雙特異性磷酸酶5(DUSP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
雙特異性磷酸酶5(DUSP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
雙特異性磷酸酶6(DUSP6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
雙特異性磷酸酶9(DUSP9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
雙調(diào)蛋白(AREG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
蠟樣芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理Gastrin/FITC 熒光素標(biāo)記胃泌素/蛙皮素IgG 規(guī)格: 0.2ml *
Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC 熒光素標(biāo)記蛙皮素受體3IgG 規(guī)格: 0.2ml *
GATA-3/FITC 熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白3IgG 規(guī)格: 0.2ml *
GATA-4/FITC 熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白4IgG 規(guī)格: 0.2ml *
GATA-5/FITC 熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白5IgG 規(guī)格: 0.2ml *
GATA-6/FITC 熒光素標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6IgG 規(guī)格: 0.2ml *
Gax/FITC 熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因IgG 規(guī)格: 0.2ml *
GCK/FITC 熒光素標(biāo)記抗葡萄糖激酶IgG 規(guī)格: 0.2ml *
GCN2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白激酶GCN2蛋白IgG 規(guī)格: 0.2ml *
Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白IgG 規(guī)格: 0.2ml *
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