注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:大豆RR/SS PCR檢測試劑盒多少錢
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
大豆RR/SS PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
羥酸氧化酶1(HAO1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forHydroxyacidOxidase1(HAO1)
血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forVascularEndothelialGrowthFactorA(VEGFA)
鱗狀細(xì)胞癌抗原2(SCCA2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forSquamousCellCarcinomaAntigen2(SCCA2)
谷氨酸脫氫酶(GDH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forGlutamateDehydrogenase1(GDH)
葡萄糖磷酸變位酶(PGM2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forPhosphoglucomutase2(PGM2)
含動力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forDyneinHeavyChainDomainContainingProtein1(DNHD1)
嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forEosinophilChemotacticFactor(ECF)
醇脫氫酶1(ADH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forAlcoholDehydrogenase1(ADH1)
胎蛋白(αFP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forAlpha-Fetoprotein(aFP)
突觸融合蛋白1A(STX1A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forSyntaxin1A,Brain(STX1A)
α1-微球蛋白(α1M)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
α1-微球蛋白(α1M)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
大豆RR/SS PCR檢測試劑盒多少錢ADRA2/FITC 熒光素標(biāo)記alpha-2腎上腺素能受體IgG 規(guī)格: 0.2ml *
ADRB1/FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β1IgG 規(guī)格: 0.2ml *
ADRB2/FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β2IgG 規(guī)格: 0.2ml *
ADRB2(phospho Ser346)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化腎上腺素能受體β2IgG 規(guī)格: 0.2ml *
ADRB2/RBITC 羅丹明標(biāo)記腎上腺素能受體β2IgG 規(guī)格: 0.2ml *
ADRB3/ Beta3-AR /RBITC 羅丹明標(biāo)記腎上腺素能受體β3IgG 規(guī)格: 0.2ml *
ADRB3/ Beta3-AR /FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺素能受體β3IgG 規(guī)格: 0.2ml *
CD8/RBITC 羅丹明標(biāo)記CD8IgG 規(guī)格: 0.2ml *
AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白IgG 規(guī)格: 0.2ml *
AD7C-NTP/NTP/AF /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白(人)IgG 規(guī)格: 0.2ml *
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