參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鼠疫耶爾森菌鼠疫桿菌PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣
英文名稱:Yersinia pestis()PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?鼠疫耶爾森菌鼠疫桿菌PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
肝配蛋白A受體10(EPHA10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forEphrinTypeAReceptor10(EPHA10)
細(xì)胞周期素I(CCNI)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forCyclinI(CCNI)
黑素瘤缺乏因子1(AIM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forAbsentInMelanoma1(AIM1)
磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forPhospholipaseCBeta3,PhosphoinositideSpecific(PLCb3)
泛素特異性肽酶8(USP8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forUbiquitinSpecificPeptidase8(USP8)
神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體1(NMUR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forNeuromedinUReceptor1(NMUR1)
下丘泌素受體1(HCRTR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forHypocretinReceptor1(HCRTR1)
90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forHeatShockProtein90kDaAlphaA1(HSP90aA1)
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forX-RayRepairCrossComplementing6(XRCC6)
血紅蛋白μ(HBμ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T forHemoglobinMu(HBm)
Raftlin 2蛋白(RFTN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
RalA結(jié)合蛋白1(RALBP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
Rap鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子1(RAPGEF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
RAR相關(guān)孤兒素受體γ(RORγ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
Ras GTP酶激活蛋白1(RASA1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
Ras相關(guān)C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格:48T/96T
鼠疫耶爾森菌鼠疫桿菌PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣Anti-SLC39A6 SLC39A6 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-Slug 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-SLC40A1/FPN1 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC40A1 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-SLC44A1/CD92 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-Smad1 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-Smad2/3 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2/3 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-phospho-Smad2(Ser465) 磷酸化Smad2 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-Smad4 Smad4 規(guī)格: 0.2ml *
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
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