運輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Redspotted Grouper Nervous Necrosis Virus(RGNNV)RTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
技術特點:
1赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測試劑盒準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4產(chǎn)品僅用于科研簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
L-乳鎂其他名稱: 乳鎂;L-乳鎂氫氧化物英文名稱: Magnesium L-lactate hydrate其他名稱: L-Lactic acid magnesium salt產(chǎn)品規(guī)格: BR,97.5%包裝:100克/500克CAS號:18917-93-6
L-乳鉀其他名稱: 乳鉀英文名稱: Potassium L-lactate其他名稱: L-Lactic acid potassium salt產(chǎn)品規(guī)格: AR,60%包裝:250毫升/1升CAS號:85895-78-9
檸檬鋅英文名稱: Zinc citrate其他名稱: Zinc chromate(VI)產(chǎn)品規(guī)格: CP,98.5%包裝:500克CAS號:546-46-3C12H10O14Zn3=574.37
葡萄糖亞鐵其他名稱: 葡萄糖鐵(II)二水合物;葡萄糖亞鐵鹽英文名稱: Iron(II) D-gluconate dihydrate其他名稱: D-Gluconic acid iron(II) salt dihydrate;Gluconic Acid Iron(II) Salt;Iron(II) Gluconate產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%包裝:100克/1公斤CAS號:22830-45-1
葡萄糖鎂英文名稱: Magnesium gluconate其他名稱: Magnesium D-gluconate;D-Gluconic acid magnesium salt產(chǎn)品規(guī)格: USP級,98%包裝:100克/500克CAS號:3632-91-5C12H22MgO14=414.60
葡萄糖銅中文名稱: 葡萄糖銅其他名稱: 雙(D-葡糖)銅;葡萄糖銅(II)英文名稱: Copper gluconate其他名稱: Copper(II) gluconate;D-Gluconic acid copper(II) salt產(chǎn)品規(guī)格: USP級,98%包裝:25克/100克/500克
葡萄糖鉀英文名稱: Potassium gluconate其他名稱: D-Gluconic acid monopotassium salt;Gluconic acid potassium salt產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%包裝:100克/500克CAS號:299-27-4C6H11KO7=234.24
脫氫乙中文名稱: 脫氫乙其他名稱: 脫氫醋;6-甲基-3-乙酰-2-哌哢;6-甲基-3-乙酰-α,γ-吡喃;3-乙酰基-6-甲基-2H-吡喃-2,4(3H)二英文名稱: DHA其他名稱: Dehydroacetic acid;3-Acetyl-4-hydroxy-6-methyl-2H-pyran-2-one;2-Acetyl-5-hydroxy-3-oxo-4-hexenoic acid delta-lactone產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%包裝:25克/100克/500克
赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測試劑盒Anti-AD7c-NTP 神經(jīng)絲蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AD7C-NTP(human) 神經(jīng)絲蛋白(人) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-AD7C-NTP 神經(jīng)絲蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-ADAMTS1 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型 規(guī)格: 0.1ml *
Anti-ADAMTS7 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-ADAMTS7(NT) 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7 (N端) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-DRADA (N terminal) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶(N端) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-DRADA (C terminal) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶(C端) 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-Adducin protein 內收蛋白 規(guī)格: 0.2ml *
Anti-ADK/AK 腺苷酸激酶 規(guī)格: 0.2ml *
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