運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理 |
英文名稱 | Porcine Enterovirus(PEV)RTPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
福氏*佐劑其他名稱: 弗氏*佐劑英文名稱: FCA其他名稱: Freund’s Adjuvant Complete產(chǎn)品規(guī)格: BR包 裝: 10毫升/10毫升×10支級(jí)別:BR
福氏不*佐劑其他名稱: 弗氏不*佐劑英文名稱: FICA其他名稱: Freund’s Adjuvant Incomplete產(chǎn)品規(guī)格: BR包 裝: 10毫升/10毫升×10支級(jí)別:BR
2,2-二羥甲基丁中文名稱: 2,2-二羥甲基丁其他名稱: 二羥甲基??;2,2-雙(羥甲基)丁;雙羥甲基丁英文名稱: DMBA其他名稱: 2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 25克/100克/500克
對(duì)稱二基偶氮羰酰肼英文名稱: Diphenylcarbazone其他名稱: Phenylazoformic acid 2-phenylhydrazide;Phenyldiazenecarboxylic acid;2-Phenylhydrazide產(chǎn)品規(guī)格: AR包 裝: 25克CAS號(hào):538-62-5C13H12N4O=240.26
石膽其他名稱: 3-羥基膽基;石膽甾;膽石英文名稱: Lithocholic acid其他名稱: 3α-Hydroxy cholanic acid;17β-(1-Methyl-3-car-boxypropyl) etiocholan-3α-ol產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%包 裝: 10克/25克CAS號(hào):434-13-9
DL-α-硫辛其他名稱: α-硫辛;DL-硫辛;1,2-二硫戊環(huán)-3-戊;DL-6,8-二硫代辛;α-硫脂;二硫辛; DL-6,8-硫辛;α-類脂;脂英文名稱: DL-Thioctic acid其他名稱: DL-α-Lipoic acid;DL-6,8-Dithiooctanoic acid;5-(Dithiolan-3-yl)valeric acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包 裝: 5克/25克/100克/500克CAS號(hào):1077-28-7
5-溴尿嘧啶中文名稱: 5-溴尿嘧啶其他名稱: 5-溴代嘧啶;5-溴-2,4(1H,3H)嘧啶二;5-溴脲嘧啶;5-溴-2,4-二羥基嘧啶;5-溴代由雪;5-溴代尿嘧啶英文名稱: 5-Bromoyuracil其他名稱: 5-Bromo-2,4(1H,3H)-pyrimidinedione產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 5克/25克/100克
原丙三乙酯中文名稱: 原丙三乙酯其他名稱: 1,1,1-三乙氧基丙;原丙乙酯;三乙氧基丙;鄰丙*酯;三乙基丙英文名稱: Triethyl orthopropionate其他名稱: Orthopropionic acid triethyl ester;1,1,1-Triethoxypropane產(chǎn)品規(guī)格: AR,97%包 裝: 25毫升/100毫升/500毫升
豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理13,14-Didehydromatridin-15-one 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
ANTIMONY PENTASULFIDE 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
D-Glucal 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
2-Iodopropane 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
1,2,4,5-Tetramethylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
Protocatechualdehyde 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
Tropicamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
Glycyl-glycyl-glycine 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(HPLC)
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