參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:派琴蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:PerkinsusPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?派琴蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
偶氮英文名稱: Azobenzene其他名稱: Azobenzide;Benzene azobenzene;Diphenyldiimide;Diphenyldiazene產(chǎn)品規(guī)格: AR包裝:25克CAS號:103-33-3C12H10N2=182.22
4-溴聯(lián)中文名稱: 4-溴聯(lián)其他名稱: 對溴聯(lián);4-溴-1,1'-聯(lián);4-溴代聯(lián);4-溴雙英文名稱: 4-Bromobiphenyl其他名稱: 4-Bromodiphenyl產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包裝:25克/100克/500克
暈英文名稱: Coronene產(chǎn)品規(guī)格: 特純,95%包裝:100毫克/1克CAS號:191-07-1C24H12=300.35級別:Purum
1,3-二溴 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,其他名稱: 間二溴英文名稱: 1,3-Dibromobenzene其他名稱: m-Dibromobenzene產(chǎn)品規(guī)格: BR,96%包裝:5克/25克/100克/500克CAS號:108-36-1
2,2-二羥基聯(lián)中文名稱: 2,2-二羥基聯(lián)其他名稱: 2,2'-二羥基聯(lián)基;2,2ˊ-聯(lián)酚;鄰,鄰ˊ-聯(lián)酚;2,2'-聯(lián)二酚;雙醇英文名稱: 2,2'-Biphenol其他名稱: 2,2'-Biphenyldiol;2,2'-Dihydroxybiphenyl產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包裝:25克
1,4-二甲氧基中文名稱: 1,4-二甲氧基其他名稱: 對二甲氧基;對二酚二甲醚;氫醌二甲醚;氫醌二甲基醚;二甲基對二酚;對二甲醚;對甲氧基;二甲氧基烯英文名稱: DMB其他名稱: 1,4-Dimethoxybenzene;Hydroquinonedimethyl ether;Dime thylhydroquinone產(chǎn)品規(guī)格: CP,99%包裝:25克/100克/500克
聯(lián)其他名稱: 基;聯(lián)二;1,1’-聯(lián)英文名稱: Biphenyl其他名稱: 1,1′-Biphenyl;Phenylbenzene;Bibenzene產(chǎn)品規(guī)格: 色標(biāo)包裝:5克產(chǎn)品規(guī)格: CP
4-甲氧基偶氮其他名稱: 對偶氮甲醚;對甲氧基偶氮英文名稱: 4-Methoxyazobenzene其他名稱: 4-Phenylazoanisole;p-Phenylazoanisole產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%包裝:1克/5克/25克CAS號:2396-60-3
派琴蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢4-Amino-6-chloropyrimidine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BC
Ethyl L-leucinate hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BS
6-Chlorohexanol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
3-Chlorobenzoyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:>90%,進(jìn)分
Metroprolol succinate 質(zhì)量規(guī)格:>90%,Ind Grade
1-[2-(Dimethylamino)ethyl]-1H-tetrazole-5-thiol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Boc-Asp-OH 質(zhì)量規(guī)格:BC
Bromine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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