運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 小鼠乳腺瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) |
英文名稱(chēng) | Mouse Mammary Tumor Virus(MMTV)RTPCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1小鼠乳腺瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
乙酸正辛酯/乙酸辛酯/醋酸辛酯/醋酸正辛酯/Octyl acetateAR,98%25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,112-14-1RT
聚(1,4-丁二醇丁二酸)酯/丁二酸乙二醇聚酯/丁二酸-1,4-丁二醇聚酯/聚-1,4-丁二醇丁二酸酯/聚丁二酸乙二醇酯/聚(乙二醇琥珀)/BDS/LAC-6R-860/HI-EFF-4B色固25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25569-53-3RT
聚乙烯乙酸酯/聚乙烯乙酸酯/聚醋酸乙烯酯/乙酸乙烯聚酯/醋酸乙烯系列乳膠/聚乙酸乙烯酯/乙酸乙烯酯均聚物/PVAC乳液/PVAAR,3-5萬(wàn)100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9003-20-7RT
碳酸丙二醇酯/碳酸丙烯酯/1,2-丙二醇碳酸/1,2-丙二醇碳酸酯/4-甲基-1,3-二氧戊環(huán)-2-酮/碳酸丙烯/丙二醇環(huán)碳酸酯/丙烯碳酸鹽/Propylene carbonateCP250毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,108-32-7RT
對(duì)羥基苯甲酸丙酯/對(duì)羥基安息香酸丙酯/尼泊金丙酯/4-羥基苯甲酸丙酯/對(duì)羥基苯甲酸正丙酯/對(duì)羥苯甲酸丙酯/Propyl parabenCP100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,94-13-3RT,避光
肉豆蔻酸異丙酯/十四酸異丙酯/十四酸1-甲基乙基酯/十四烷酸異丙酯/十四碳酸異丙酯/IPMCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,110-27-0RT
硼酸三正丁酯/硼酸三丁酯/三丁氧基甲/硼酸丁酯/硼酸正丁酯/三正丁氧基硼/三丁氧硼/Tributyl borateCP,99%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,688-74-4RT
亞磷酸三丁酯/亞磷酸正丁酯/亞磷酸三正丁酯/三(正丁氧基)膦/Tributyl phosphiteBR,94%100毫升進(jìn)分102-85-2RT
磷酸三苯酯/三聚磷酸酯/增塑劑/磷酸苯酯/磷酸三苯酚酯/磷酸三苯基酯/TPPCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,115-86-6RT
亞磷酸三苯酯/三苯基亞磷酸鹽/亞磷酸三苯基酯/亞磷酸苯酯/磷酸苯酯/Triphenyl phosphiteCP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,101-02-0RT
硅酯H-295/H295硅酯/H295 EstersilCP1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT
棕櫚油酸甲酯/(Z)-十六烯酸甲酯/棕櫚烯酸甲酯/Methyl palmitoleate特純,98.5%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1120-25-8保存:-20℃
硫酸銨/硫酸铔/硫銨/硫氨/肥田粉/Ammonium sulfateAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7783-20-2RT
四庚基溴化銨/溴化四庚銨/四正庚基溴化銨/溴化四庚基銨/溴化四正庚基銨/Tetraheptylammonium bromide特純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,4368-51-8RT
小鼠乳腺瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)INDOXYL ACETATE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TRI(2-FURYL)PHOSPHINE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR
NA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Sodium bisulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Clopidogrel sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SILVER TRIFLUOROMETHANESULFONATE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
3,3'-DIMETHOXYBENZIDINE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
DL-3-HYDROXYBUTYRIC ACID SODIUM SALT 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品
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