技術(shù)特點(diǎn):
1牛莫拉氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱 | 牛莫拉氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Moraxella bovisPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
苯甲酰三氟丙酮/1-苯基-4,4,4-三氟-1,3-丁二酮/苯酰三氟丙酮/3-苯甲酰-1,1,1-三氟丙酮/4,4,4-三氟-1-苯基-1,3-丁二酮/BFA/BTAAR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,326-06-7RT
雙吡唑酮/雙吡唑啉酮/雙(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)/4,4′-雙(3-甲基-1-苯基吡唑啉-5-酮)/4,4′-雙(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)/3,3′-二甲基-1,1′-二苯基[4,4′-雙(2-吡唑啉)-5,5′-二酮]/2,2'4,4'-四氫-5,5'-二甲基-2,2'-二苯基-[4,4'-雙-3H-吡唑]-3,3'-二酮/雙(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮)/4,4-雙(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮)/Bis-pyrazoloneAR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7477-67-0RT
環(huán)辛酮/CyclooctanoneBR,97%25克進(jìn)分502-49-8RT
2-癸酮/甲基辛基酮/甲基辛基甲酮/甲基正辛基甲酮/2-癸烷/甲基正辛基酮/2-DecanonePure,95%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,693-54-9RT
9-芴酮/芴酮,亞/9H-芴-9-酮/芴氧/二苯并五環(huán)酮/9-側(cè)氧茀/9-FluorenoneBR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,486-25-9RT
2-氟苯乙酮/鄰氟苯乙酮/2'-Fluoroacetophenone特純,97%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,445-27-2RT
α-紫羅酮/甲位紫羅蘭酮/alpha-紫羅蘭酮/4-(2,6,6-*基-2-環(huán)己烯基-1-基)-3--2-酮/α-紫羅蘭香酮/α-芷香酮/α-呫辛酮/α-IononeBR,90%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,127-41-3RT
4-甲氧基苯乙酮/4-甲氧基乙酰苯/對(duì)甲氧基苯乙酮/山楂花酮/4-MethoxyacetophenoneCP,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100-06-1RT,避光
1-甲基-2-吡咯烷酮/N-甲基吡咯烷酮/1-甲基吡咯烷酮/N-甲基-2-吡咯烷酮/NMP溶劑/二異丙基酮/N-甲基-α-吡咯烷酮/NMP/M-PYROLCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,872-50-4RT,避光
α-萘黃酮/7,8-苯并黃酮/苯并黃素/萘黃酮/2-苯基-7,8-苯并色酮/α-NaphthoflavoneGR,97%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,604-59-12~8℃,避光
4-硝基苯乙酮/4-硝基乙酰苯/對(duì)硝基苯乙酮/對(duì)硝基乙酰苯/1-(4-硝基苯基)乙酮/4-NitroacetophenoneCP25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100-19-6RT
2-壬酮/甲基庚基甲酮/甲基庚甲酮/甲基庚基酮/2-酮基壬烷/甲庚酮/2-NonanoneGR,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,821-55-6RT
氮酮/月桂氮卓酮/月桂氮酮/阿左恩/1-十二烷基氮雜環(huán)庚烷-2-酮/1-十二烷基-2H-氮雜-2-酮/N-月桂基氮雜環(huán)庚烷-2-酮/N-月桂基己內(nèi)酰胺/吖酮/1-正十二烷基氮雜環(huán)庚烷-2-酮/AzoneAR,99%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,59227-89-3RT,避光
吡啶鹽酸鹽/鹽酸吡啶/嘧啶鹽酸鹽/Pyridine hydrochlorideCP,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,628-13-7RT,避光
牛莫拉氏菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢1-Chloroethyl chloroformate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2',4'-Dimethylacetoacetanilide 質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
NA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NITRITE STANDARD 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Carbonyldihydrotris(triphenylphosphine)ruthenium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-(Trifluoromethyl)benzenesulfonyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TRIETHYLENE GLYCOL MONOMETHYL ETHER 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
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