注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肺炎病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣
英文名稱:MetaRTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
肺炎病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
對羥基苯丙酮酸/4-α-二羥基桂皮酸/4-α-二羥基肉桂酸/α-羥基對香豆酸/4-Hydroxyphenylpyruvic acidBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,156-39-8RT
2-丁酮酸/2-氧代丁酸/3-甲基丙酮酸/丙酰基甲酸/2-酮丁酸/2-Ketobutyric acidBR,97%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,600-18-0RT
苦酮酸/4-硝基-3-甲基對硝基苯基-5-吡唑啉酮/3-甲基-4-硝基-1-(對硝基苯)-2-吡唑啉-5-酮/1-(對硝基苯)-3-甲基-4-硝基-5-吡唑啉酮/4-硝基-3-甲基-1-(對硝基苯)-5-吡唑啉酮/3-甲-4-硝-1-對硝苯-5-吡唑啉酮/Picrolonic acidCP,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,550-74-3RT
丙酮酸/乙酰甲酸/2-氧代丙酸/2-酮基丙酸/α-酮基丙酸/乙鹽甲酸/乙酰基甲酸/Pyruvic acidAR,98%250克國產(chǎn)127-17-32~8℃,避光
月桂酸/十二酸/正十二酸/十二烷酸/Lauric acidCP,98%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,143-07-7RT
反丁烯二酸/延胡索酸/富馬酸/紫堇酸/E)-2-丁烯二/反-1,2-乙烯二羥酸/1,2-乙烯二羧酸/(E)-2-丁烯二酸/TMEDACP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,110-17-8RT
戊二酸/膠酸/1,3-丙烷二羧酸/A,γ-丙烷二羧酸/1,3-丙二羧酸/Glutaric acidCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,110-94-1RT
丁二酸/琥珀酸/亞乙基二羧酸/1,2-乙烷二甲酸/Succinic acidAR,99.5%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 110-15-6RT
丁二酸鈉六水合物/琥珀酸鈉/六水丁二酸二鈉/丁二酸二鈉鹽/琥珀酸二鈉鹽/Sodium succinate dibasic hexahydrateAR,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6106-21-4RT
丁二酸鈉/琥珀酸鈉/丁二酸二鈉/丁二酸二鈉鹽/琥珀酸二鈉鹽/Sodium succinate dibasicAR,99%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,150-90-3RT
丁二酸銨/琥珀酸銨/丁二酸二銨/琥珀酸二銨/Ammonium succinateAR,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 2226-88-2RT,避光
己二酸/1,6-己二酸/肥酸/己二酸酯/1,4-丁二羧酸/1,4-丁烷二羧酸/Adipic acidAR,99.5%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,124-04-9RT
壬二酸/杜鵑花酸/1,7-壬二酸/庚烷-1,7-二羥酸/王二酸/Azelaic acidAR,88%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 123-99-9RT
內(nèi)消旋-2,3-二溴丁二酸/2,3-二溴丁二酸/二溴丁二酸/α,β-二溴代琥珀酸/ MESO-2,3-二溴琥珀酸/間-2,3-二溴丁二酸/MESO-2,3-二溴丁二酸/meso-2,3-Dibromosuccinic高純,98%100克進分608-36-6RT
肺炎病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣Vitamin E 質(zhì)量規(guī)格:UV≥97%,BR
LINDERANE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
2-(Trifluoromethyl)benzonitrile 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Thioanisole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
TRIS(4-(1H,1H,2H,2H-PERFLUOROOCTYL)PHENYL)PHOSPHINE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
BENZO[E]PYRENE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Schisantherin A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
1-Hexyl-3-methylimidazolium chloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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