產(chǎn)品及特點:
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱 | 同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Menangle Virus()RTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
1,5-萘二磺酸四水物/阿姆斯特朗酸/萘-1,5-二磺酸/天藍酸/2-萘胺-1,5-二磺酸/磺化吐氏酸/L酸/1,5-Naphthalene disulfonic acidCP,98.5%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,211366-30-2RT
1,5-萘二磺酸鈉/1,5-萘二磺酸二鈉鹽/萘-1,5-二磺酸鈉鹽/Sodium 1,5-naphthalenedisulfonate dibasicCP,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1655-29-4RT
2-萘胺-1-磺酸/托拜厄斯酸/2-氨基萘-1-磺酸/2-氨基-1-萘磺酸/脫拜厄斯酸/吐氏酸/2-Naphthylamine-1-sulfonic acidAR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,81-16-3RT,避光
甲基磺酸乙酯/甲烷磺酸乙酯/甲磺酸乙酯/EMS高純,99%5克進分62-50-0RT
庚烷磺酸鈉/1-庚烷磺酸鈉/庚烷-1-磺酸鈉鹽/正庚基磺酸鈉鹽/正庚烷磺酸鈉/Sodium 1-heptanesulfonate超純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,22767-50-6RT
戊烷磺酸鈉/1-戊烷磺酸鈉/戊烷-1-磺酸鈉鹽/正戊烷磺酸鈉/戊基磺酸鈉/Sodium 1-pentanesulfonate超純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,22767-49-3RT
己烷磺酸鈉/1-己烷磺酸鈉/己烷-1-磺酸鈉鹽/Sodium 1-hexanesulfonateIPC,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2832-45-3RT
辛烷磺酸鈉/1-辛烷磺酸鈉/1-辛基磺酸鈉/辛烷基磺酸鈉/正辛烷磺酸鈉/Sodium 1-octanesulfonateIPC,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5324-84-5RT,避光
丁烷磺酸鈉/1-丁烷磺酸鈉/丁烷-1-磺酸鈉鹽/1-丁基磺酸鈉/正丁烷磺酸鈉/Sodium 1-butanesulfonateIPC,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2386-54-1RT
癸烷磺酸鈉/1-癸烷磺酸鈉/十烷磺酸鈉/十烷基磺酸鈉/正癸磺酸鈉鹽/正癸基磺酸鈉/Sodium 1-decanesulfonateIPC,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13419-61-9RT
1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸鈉/H酸單鈉鹽/4-氨基-5-羥基-2,7-萘二磺酸一鈉/H酸一鈉鹽/1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽/H-酸鈉鹽/8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽/H acid monosodium saltCP,95%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:5460-09-3RT,避光
氨基磺酸鎳/磺酰胺酸鎳/Nickel sulfamateCP,98%1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,124594-15-6RT
蒽醌-2-磺酸鈉/銀鹽/蒽喹啉-2-磺酸鈉鹽/9,10-蒽醌-2-磺酸鈉鹽/Anthraquinone-2-sulfonic acid sodium salt monohydrateBR,97%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,153277-35-1RT
3-硝基苯磺酸鈉/間硝基苯磺酸鈉/坊染鹽S/防染鹽S/M-硝基苯磺酸鈉/3-Nitrobenzene sulfonic acid sodium saltCP,98.5%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,127-68-4RT
同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒Disodium tartrate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
N-Phenylpiperidine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Diphenic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
2-ACETAMIDO-2-DEOXY-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSYL CHLORIDE 3,4,6-TRIACETATE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
vegetable oil acid 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%
Ethyl 4-oxocyclohexanecarboxylate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Piperine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Cyclopropyl carbinol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
技術(shù)特點:
1產(chǎn)品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結(jié)果與金標準測序法比對,結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
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