產(chǎn)品及特點:
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱 | 溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒哪家代理 |
英文名稱 | Mannheimia haemolyticaPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒哪家代理低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
萎銹靈/2,3-二氫-5-(N-甲酰苯胺)-6-甲基-1,4-氧硫雜芑/CarboxinBR,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5234-68-4RT
氯磺隆/Carboxin分析標(biāo)準(zhǔn)品,92%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,64902-72-3RT
氟啶酮/1-甲基-3-苯基-5-(3-三氟基)-4(1H)-吡啶酮/氟定酮/氟啶草酮/氟草酮/Fluridone分析標(biāo)準(zhǔn)品250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,59756-60-4RT
呋嘧醇/2-甲基-1-嘧啶-5-基-1-(4-三氟甲氧基苯基)丙-1-醇/氟嘧醇/Flurprimidol分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,56425-91-3RT
草雙甘膦/草甘膦/N-(膦?;谆?甘氨酸/N-膦羧基甲基甘氨酸/N-(磷?;谆?甘氨酸/N-(膦酰甲基)氨基乙酸/農(nóng)達/鎮(zhèn)草寧/GlyphosateBR,95%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1071-83-6RT
標(biāo)準(zhǔn)溶液,100ug/ml1毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
嗪草酮/4-氨基-6-叔丁基-4,5-二氫-3-甲硫基-1,2,4-三嗪-5(4H)-酮/4-氨基-6-(1,1-二甲乙基)-3-甲硫基-1,2,4-三嗪-5(4H)-酮(9CI)/賽克/賽克津/賽克嗪/特丁嗪/塞克津/4-氨基-6-特丁基-3-甲硫基-1,2,4-三嗪-5-酮/甲草嗪/MetribuzinBR100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,21087-64-9RT
2-萘氧乙酸/β-萘氧乙酸/(2-萘氧基)乙酸/2-萘氧基乙酸/BNOABR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,120-23-0RT
2-萘氧乙酸鈉/β-萘氧乙酸鈉/2-Naphthoxyacetic acid sodium saltBR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10042-71-4RT
1-萘乙酰胺/2-(1-萘基)乙酰胺/α-萘乙酰胺/萘乙酰胺/1-萘基乙酰胺/N-乙酰-1-萘胺/N-1-萘乙酰胺/NAA Amide/Amid-Thin WBR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,86-86-2RT
氟樂靈/氟樂寧/氟特力/茄科寧/特氟力/TrifluralinBR,97%250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1582-09-8RT
表兒茶素/(-)-表兒茶素/3,5,7,3ˊ,4ˊ-五羥基黃烷/Ι-表兒茶素/Ι-表兒茶酸/(EC) 表兒茶素/表兒茶酚/表兒茶精/2-(3,4-羥基苯基)-3,4-二氫-2H-1-苯并吡喃-3,5,7-三醇/(−)-Epicatechin純,98%20毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,490-46-02~8℃,避光
吲哚-3-丙烯酸/3-吲哚丙烯酸/3β-吲哚丙稀酸/IAABR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1204-06-4RT
(E)-3-吲哚丙烯酸/反式-3-吲哚丙烯酸/反式吲哚-3-烯丙酸/反-3-吲哚丙烯酸/反吲哚-3-烯丙酸/IAABR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,29953-71-7RT
溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒哪家代理2,4,6-Trichloropyrimidine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ethoxyquin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ferrocenecarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Methoxyethoxymethyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-[4-(tert-Butoxycarbonyl)piperazino]benzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
N-Boc-4-piperidinemethanol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ethyl L-tryptophanate hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
3-Dimethylaminopropylamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
技術(shù)特點:
1產(chǎn)品僅用于科研準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對,結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
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