注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)
英文名稱(chēng):Human Rhinovirus 9 9 PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
原蘇木素B中文別名: 原巴西蘇木素 英文名: Protosappanin B CAS登錄號(hào): 102036-29-3 分子式: C16H16O6 分子量: 304.09
蔓荊子黃素中文別名: 紫花牡荊素 英文名: Vitexicarpin 英文別名: Casticin CAS登錄號(hào): 479-91-4 分子式: C19H18O8
牡荊素中文別名: 5, 7, 4’-三羥基黃酮-8-C-β-D-葡萄糖苷 英文名: Vitexin 英文別名: Apigenin 8-C-glucoside; Vitexina; 4H-1-Benzopyran-4-one, 8-β-D-glucopyranosyl-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)- CAS登錄號(hào): 3681-93-4 分子式: C21H20O10
馬錢(qián)苷酸中文別名: 馬錢(qián)酸; 落干酸 英文名: Loganic acid 英文別名: Loganate CAS登錄號(hào): 22255-40-9 分子式: C16H24O10
乙酰哈巴苷中文別名: 8-O-乙酰哈巴苷 英文名: 8-O-Acetylharpagide 英文別名: Acetylharpagide; (1S,4aS,5R,7S,7aS)-1-(hexopyranosyloxy)-4a,5-dihydroxy-7-methyl-1,4a,5,6,7,7a-hexahydrocyclopenta[c]pyran-7-yl acetate CAS登錄號(hào): 6926-14-3 分子式: C17H26O11
白楊素中文別名: 柯因;5,7-白楊黃素;金黃酮;白楊黃素 英文名: Chrysin 英文別名: 5,7-dihydroxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one CAS登錄號(hào): 480-40-0 分子式: C15H10O4
巴西蘇木素中文別名: 巴西木素;巴西紅木精;巴西靈 英文名: Brazilin 英文別名: Benz[b]inde,2-d]pyran-3,6a,9,10(6H)-tetrol,7,11b-dihydro-, (6aS-cis)- (7CI,8CI); Brazilin (6CI); (+)-Brazilin; Brasilin;Braziletto; Hypernic Extract; Limawood Extract; NSC 56652; Pernambuco Extract;Superbresiline CAS登錄號(hào): 474-07-7 分子式: C16H14 O5
10-脫乙酰巴卡亭中文別名: 10-脫巴卡?、?英文名: 10-Deacetylbaccatin III 英文別名: 10-DAB CAS登錄號(hào): 32981-86-5 分子式: C29H36O10
仙茅苷中文別名: 仙茅甙 英文名: Curculigoside 英文別名: Curculigoside A;β-D-Glucopyranoside, 2-[[(2,6-dimethoxybenzoyl)oxy]methyl]-4-hydroxyphenyl CAS登錄號(hào): 85643-19-2 分子式: C22H26O11
鉤藤堿英文名: Rhyncholphylline CAS登錄號(hào): 76-66-4 分子式: C22H28N2O4 分子量: 384.46 分子結(jié)構(gòu):
紫云英苷中文別名: 紫云英甙;莰非醇-3-O-葡萄糖苷;-3-O-葡萄糖醛酸苷;黃芪苷;百蕊草素II 英文名: Astragaline 英文別名: Kaempferol 3-O-beta-D-glucopyranoside; 5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one CAS登錄號(hào): 480-10-4 分子式: C21H20O11
人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)D-苯丙氨醇,1gIcariin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
D-苯丙氨醇,25gAPTS 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
D-苯丙氨醇,5gTungsten trioxide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
氨醇,100gPerfluoro-1-iodohexane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
氨醇,25gCELLULOSE ACETATE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
氨醇,5gDimethyl oxalate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
D-脯氨醇,1gEthyl acetamidoacetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
D-脯氨醇,25gBlood Agar Base 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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