注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:中央無漿體PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理
英文名稱:Anaplasma centrale PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
中央無漿體PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
酸性成纖維細(xì)胞生長因子Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C19H18N2O2英文名稱:Sophoraflavanone I性狀:Powder純度:98.5%
酸性成纖維細(xì)胞生長因子Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C21H17NO5英文名稱:Kaempferol 3-O-rhamninoside性狀:Powder純度:98.5%
松弛肽/松弛素Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C22H19NO5英文名稱:Homoeriodictyol性狀:Powder純度:98.0%
松弛素Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C34H43NO10英文名稱:Sophoraflavanone H性狀:Powder純度:96.5%
四氫生物蝶呤Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C33H47NO10英文名稱:Tupichinol A性狀:Powder純度:97.0%
四連接素Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C5H4N4O英文名稱:Viscumneoside III性狀:Powder純度:99.0%
死亡相關(guān)蛋白1Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C35H49英文名稱:Neorauflavene性狀:Powder純度:98.0%
絲狀血球凝集素Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C37H51NO12英文名稱:Sanggenon N性狀:Powder純度:97.5%
絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C22H26N2O3英文名稱:Dodonaflavonol性狀:Powder純度:98.0%
絲裂原活化蛋白激酶激酶6Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C39H46N2O8英文名稱:Glepidotin B性狀:Powder純度:97.0%
絲裂原活化蛋白激酶Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C31H28N2O7英文名稱:3,6-Dimethoxyapigenin性狀:Powder純度:96.5%
絲氨酸肽酶2甘露聚糖結(jié)合凝集素Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C19H22N2O3英文名稱:5'-Prenylaliarin性狀:Powder純度:97.0%
絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3GElisa檢測(cè)試劑盒分子式:C20H23N3O英文名稱:4'-O-Methyllicoflavanone性狀:Powder純度:95.0%
絲氨酸蛋白酶HTRA1Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C31H43NO7英文名稱:2-Hydroxynaringenin性狀:Powder純度:96.0%
絲氨酸蛋白酶Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C31H43NO8英文名稱:Prunetin性狀:Powder純度:97.5%
絲氨酸/蘇氨酸激酶24Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C30H41NO7英文名稱:2''-Acetylastragalin性狀:Powder純度:97.0%
中央無漿體PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理詹納斯綠B染色液(0.2%),10mlN-ACETYL-L-TYROSINE ETHYL ESTER 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
詹納斯綠B染色液(0.5%),10ml2-Acetamidoacrylic acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP2007,EP5.
線粒體染色液(Altmann法),3*50ml2,5-Dibromoterephthalic acid diethyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
甲基藍(lán)溶液(Methyl blue,1%),100mlLevodopa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
苯酚溶液(5%),100ml5-BROMOPYRIDINE-3-SULFONYL CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6
番紅O乙醇溶液(0.5%),100mlCellulose diacetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
番紅O染色液(0.1%),100mlL-Threonic acid calcium salt 質(zhì)量規(guī)格:>95%
番紅O染色液(0.1%),50ml2-Amino-5-chloro-3-methylbenzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
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